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紫外光谱法测

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紫外光谱法测

实验设计

设计人：郭金勇

用紫外光谱法测量实验计划

摘要:

茶叶是人类最佳的天然保健材料，茶叶中含有机化合物450多种，无机矿物质15种以上，及

人体必需的营养成分和药用成分，茶对血管硬化，高血压、动脉粥样硬化、放射损伤、肿瘤、免疫功能降低的防治都有效，寓保健、养生、防癌功能于品茗之中，这是其他饮料无法取代的。

茶叶中含有多种生物碱，其中主要成分为，少量的可以使身体处于兴奋之中。刺激机体的中枢神经系统，诱发肾上腺素释放入血，增加机体血糖水平，注意力集中，过量的可以使精神疲倦，身体发颤，难以入睡，刺激胃黏膜，一般成年男性消耗200mg，多则无益，因此研究茶叶中含量，有助于我们更好的对茶有新的认识。

茶叶中含量测定曾是国内外的热门。常用的方法有液相谱法或者紫外分光光谱法。这里我采用紫外分光光谱法，主要原因是紫外分光光谱法方法简单，快速稳定、准确、灵敏度高、干扰物排除能力强，同时也是对所学知识的一种巩固运用。

一、实验原理：

仪器工作原理：物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特

定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

　紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。朗伯定律是说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比；如果同时考虑吸收层厚度和溶液浓度对光吸收率的影响，即得朗伯-比耳定律。

的无水乙醇溶液在273nm下有最大吸收，其吸收值的大小与浓度成正比，从而进行定量的测定。

二、实验用品及仪器：

1.仪器:蒸发皿，紫外分光光度计。

2.试剂: 无水乙醇，标准样品(纯度98%以上)，标准储蓄液(0.5mg·ml-1)，蒸馏水等所有试剂均由化学化工学院化学实验室提供。

三、定性分析：

利用紫外——可见分光光度计可以测出待测化合物的吸收带在哪个范围内，初步确定化合物的归属范围。然后，采取对比法才能进一步确定是何种化合物。所谓对比法，一般是将未知试样的紫外——可见吸收光谱图同标准试样的光谱图进行比较。当条件相同时，若两者的谱图相同，说明两者是同一化合物。若无标准物，可与该化合物的标准谱图进行对比，常见光谱图集有“The Sadtler Sdandard Spectra，Ultraviolet”，该图谱收集46000种化合物的紫外光谱并附有五种索引，便于查。

四、定量分析实验步骤：

1、吸收曲线绘制:

　准确称取对照品若干 ,溶于无水乙醇中,将溶液转入100 mL 容量瓶中工位管理系统,分别用无水乙醇稀释至刻度,在200 纱窗角码～300 nm 之间用紫外分光光度计进行波长扫描,在273 nm 处;在无水乙醇中有最大吸收波长。

2、标准曲线绘制: 教室管理系统

♦从无水乙醇为溶剂的储备液( c = 500. 0μ托玛琳活水杯g/ mL) 中移取适量标准品于7 个50 mL 容量瓶中用无水乙醇定容,得到浓度为2. 00 ,4. 00 ,6. 00 ,8. 00 ,10. 00 ,12. 00 ,14. 00μg/ mL 的系列标准溶液。在紫外分光光度计上测其在273 nm处的吸光度A ,得标准曲线。

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