rna反转录成cdna原理

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喷粉房rna反转录成cdna原理
    rna反转录成CDNA是一种构建复制DNA的技术,是一种以RNA为模板的DNA合成的技术。在这一过程中,RNA的反义密码子子单体被连接成一条双链DNA,而正义RNA密码子被转换为DNA密码子。这一过程可以利用反转录酶来实现,而后可用来对后面的对应克隆技术,以获得DNA的复制产物。
    rna反转录成CDNA的原理可以分为三个步骤:
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    第一步:rna-DNA引物亲和结合。双链DNA引物与细胞内的某一特定的RNA分子结合产生反转录酶复合物,此时双链DNA引物也打开了RNA反义链。
石英毛细管    第二步:反转录酶由双链DNA引物将RNA的反义密码子子单体转录成对应的DNA密码子子单体,并加上末端含有5’甲基脱羧基,形成单链DNA。
尼龙袋    第三步:DNA引物酶与双链DNA引物结合,一旦DNA反义链被开启, DNA引物酶将DNA的反义密码子子单体转录成的DNA的正义密码子子单体加到DNA反义链末端,完成该双链DNA子单体的合成,合成完成的双链DNA子单体进行复制而单链DNA子单体可以直接分离出
来。
    反转录成CDNA技术可以用来生成特定基因组上的基因,包括特定的外源性基因以及内源性基因以及mRNA。这一技术也可以用来分析基因表达的模型,因此在基因表达研究中用到较多。此外反转录成CDNA也用于基因组学研究,用来解析像基因组结构、基因组进化和基因组功能的问题。
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本文发布于:2024-09-22 16:49:51,感谢您对本站的认可!

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