实训一 常用玻璃器皿的清洗、包扎及干热灭菌

实训一常用玻璃器皿清洗、包扎及干热灭菌
一、实验目的
1、熟悉微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品;
2、掌握实验室常用玻璃器皿的清洗和包扎方法;
3、了解干热灭菌原理,掌握玻璃器皿干热灭菌操作技术。
二、实验原理
(一)微生物常用器皿、物品
微生物实验常用玻璃器皿的名称、规格及配套使用物品介绍,见表1-1。
表1-1  微生物实验常用玻璃器皿的名称和规格
指纹挂锁
接上表1-1
常用玻璃器皿用途:
1、烧杯用于盛装、转移、配制、加热培养基及试剂。
2、三角瓶用于贮盛生理盐水或培养基,底大口小,以便加塞,
并能平稳放置。
3、容量瓶用于准确地配制一定浓度的溶液。
4、量筒用于量取液体培养基、蒸馏水等。
矿泉水瓶盖5、移液管用于吸取试剂、培养液和生理盐水等。
6、培养皿主要用于细菌分离和培养,由底、盖两部分组成,
钢木模板
底、盖大小应合适,不宜过紧或过松,皿盖高度较皿底稍低,皿底应平正。
7、漏斗分为长颈和短颈两种,常用口径为60-150mm,用于分
装培养基、溶液或过滤。
8、滴定管分为酸式和碱式两种,用于准确量取或滴定酸性/碱性
溶液。
9、试剂瓶分为广口和小口两种,用于贮备试剂,有棕和无
两种,前者盛避光试剂。
标定10、试管用于盛平板用的培养基和稀释用的无菌水、做斜面培
养基用以及用于各种生理生化鉴定试验。不同规格试管的用途,没有严格的划分,以便于工作、节省材料为原则。
11、载玻片和盖玻片用于微生物涂片观察及标本制备。
水箅12、坩埚用于固体物质的灼烧,溶液的蒸发、浓缩或结晶。
13、研钵用于研磨固体物质或进行粉末状固体物质的混合。
14、玻璃棒直径3-5mm,用于搅拌液体。
15、玻璃珠常用中性硬质玻璃制成,直径3-4mm和5-6mm,用于
打碎组织、样品和菌落等。
其他微生物实验常用物品名称、常用规格、型号介绍见表1-2。
表1-2  其他微生物常用物品名称、常用规格、型号
接上表1-2
(二)微生物常用玻璃器皿清洁
清洁的玻璃器皿是得到正确实验结果的重要条件之一。清洗的目的就在于除去玻璃器皿上的污垢(灰尘、油垢、无机盐类等物质),使其不能妨碍得到正确的实验结果。清洗玻璃器皿的方法有机械清洗方法和化学清洗方法。机械方法是用铲、刮、刷等方法清洗;化学方法是利用化学去污溶剂清洗。实验室常用的洗涤剂有肥皂、去污粉、洗衣粉和洗涤液。
1、肥皂使用肥皂时用湿刷子(试管刷、瓶刷)沾肥皂刷洗容器,
再用水洗去肥皂。热的肥皂水(5%)去污能力很强,可以有效洗去器皿上的油脂。
2、去污粉使用去污粉时先将仪器润湿,将去污粉涂抹在污点上,
用布或刷子擦拭,再用水洗去去污粉。
3、洗衣粉使用1%的洗衣粉洗涤载玻片和盖玻片,可以达到良好
的清洁效果。
4、洗涤液常用的洗涤液是重铬酸钾(或)的硫酸溶液。
重铬酸钾与硫酸作用后形成的铬酸是一种强氧化剂,去污能力非常强,常用于洗去玻璃和瓷质器皿上的有机质。切不可用于洗涤金属器皿。配方如下:
①浓配方:
重铬酸钾(工业用)50g,浓硫酸(粗)800mL,蒸馏水150mL。
②稀配方:
重铬酸钾(工业用)50g,浓硫酸(粗)100mL,蒸馏水850mL。
配法:将重铬酸钾溶解在蒸馏水中(可加热),待冷却后,再慢慢地加入浓硫酸,边加边搅拌,配好后存放备用。此液可使用很多次,每次用后倒回瓶中贮存,直至洗涤液变成青褐时才失效。(三)玻璃器皿干热灭菌原理
微生物实验还要进行灭菌。为保证灭菌后的无菌状态,需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎,试管和三角瓶等要做棉塞。
干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。空气的传热性能和穿透力比饱和蒸汽差,同时细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关。在菌体受热时,当环境和细胞内含水量越大,则蛋白质凝固越快,菌体越容易被杀死;反之则越缓慢。因此,与湿热灭菌相比,干热灭菌需要的灭菌温度更高,时间更长。一般是把待灭菌的物品包装就绪后,放入电烘箱中烘烤,加热至160-170℃维持1-2h或140℃维持3h,才能达到彻底灭菌的目的。干热灭菌法主要用于空玻璃器皿(如吸管、培养皿等)、金属器皿及其他耐干燥、耐热物品的灭菌。凡带有橡胶的物品,塑料制品、液体及固体培养基等都不能用此法灭菌。
三、实验材料
1、常用玻璃器皿:量筒、三角瓶、试管、培养皿、漏斗、玻棒和吸
雨刷片
管等
2、常用洗涤剂:去污粉、肥皂、洗衣粉、洗涤液
3、其他:牛皮纸或报纸、棉花、线绳、试管刷、干热灭菌箱等
四、实验时间
2个课时

本文发布于:2024-09-21 13:36:26,感谢您对本站的认可!

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