乙肝五项检测（乳胶法)
（一)检测目的
乙型肝炎病毒标志物（HBsAgHBsAh、HBeAg、HBeAb、HbcAb）检测。
铌高（二）测定原理
HBsAg、HBsAh、HBeAg均采用双抗体(原）夹心法原理。用抗HBsAg多克隆抗体包被硝酸纤维素膜,配以红乳胶标记的抗HBs鲰单克隆抗体HBsAh,应用双抗体夹心法原理，定性检测血清／血浆中HBsAg；用HBsAg重组抗原和链霉亲和素一BSA包被硝酸纤维素膜，配以红乳胶标记的HBs如重组抗原和生物素一BSA及其他试剂，应用双抗体夹心法原理，定性检测血清／血浆标 本中HBsAb；用抗HBeAg单克隆抗体（Ehl）包被硝酸纤维素膜，配以红乳胶标记的抗HBeAg单克隆抗体（Eh2）。应用双抗体夹心法原理，用于定性检测血清或血浆中HBeAg.
HBsAg、HBsAb、HBeAg测试时，将血清／血浆标本滴人试剂板加样处．标本在毛吸效 应下向E层析，如标本中含有相应的待测物质,在测试区(T)内会出现一条红条带，则是阳性结果。如标本中不含有相应的待测物质，则测试区（T）将没有红条带，是阴性结果。无论待测物质是否存在于标本中，一条红条带都会出现在质控区内(c）。质控区内（c)所显现的红条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。 HBeAh、HBcAh采用竞争法原理。用HBeAg重组抗原包被硝酸纤维素膜，配以乳胶标记的鼠抗HBeAg单克隆抗体.应用竞争抑制法原理,定性检测血清／血浆巾HBeAI，；用HBcAg重组抗原包被硝酸纤维素膜，配以乳胶标记的HBcAb单克隆抗体，应用竞争抑制法原理,定性检测血清／血浆中HB。Ah。
测试HB.Ah、HBcAb时，将血清／血浆标本滴入试剂板加样处，随之标本在毛吸效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体．则同膜上测试区（T）的单克隆抗体竞争与预包被在乳胶颗粒上的相应抗原反应。如标本中没有相应的抗体，预包被在乳胶颗粒上的相应抗原则同膜上测试区(T)的单克隆抗体全部结合.阳性标本，测试区（T）将没有红条带；阴性标本,测试区（T)会出现明显的红条带c无论相应的抗体是否存在于标本中，一条红
条带都会出现在质控区内（c）。质控医内(c）所显现的红条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准．
（三)操作步骤
具体方法参照试剂盒说明书。举例如下：
在进行任何测试前必须先完整阅读使用说明书．使用前将试剂板和血清／血浆标本恢复至室温（20～30％).从原包装铝箔袋中取出试剂盒(注意：在扣开铝箔前应先恢复至室温)，在l小时内应尽快地使用.
1。将试剂盒置于干净平坦的台面上，用吸管吸取血清／血浆标本，逐滴垂直加入于试剂板的五个加样子L中（每孔2。3滴）.
变压器温控仪
2.加样后立刻开始计时，等待红条带的出现，在15分钟时读取测试结果.在20分钟后读取的结果无效．
（四)结果判定
大尺寸触摸屏
橡胶衬套
由于前三个项目HBsAg、HBsAb、HBeAg使用双抗体(原)夹心法原理，后两个项日HBeAb、HbcAb使用竞争法原理。因此前一：个项日与后两个项目判读方法是不同的．请注意区别.
l 。HBsAg、HBsAb、HbeAg
（1）阳性(+）：两条红条带出现。一条于测试区（T）内,另一条位于质控区（C)。阳性结果表明:标本中含有待测物质。
(2)阴性(一):质控区(c）出现一条红条带，在测试区(T)内无红条带出现。阴性结果表明:标本中检测不出待测物质。
（3)无效:质控区(c）未出现红条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已经变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂盒重新测试.如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系.
（4）注意:在进行HBsAg、HBsAb、HbeAg测试时，测试区（T)内的红条带可显现出颜深浅的现象。只要在规定的观察时间内，不论该条带颜深浅，即使只有非常弱的
带也应该判为阳性结果。
2 HBeAb、HBcAb
（1）强阳性(+):仅质控区(c)出现一条红条带．在测试区（T）内无红条带出现.阳性结果表明：标本中含有待测物质。集成电路测试
（2）弱阳性（+)：质控区（c)出现一条红条带，在测试区(T)内有非常弱的红条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测物质。
(3)阴性(一)：两条红条带出现.一条于测试区(T)内,另一条位于质控区(c).阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。
（4）无效：质控区(c）未出现红条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已经变质损坏。在此情况下，应重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品,并与当地供应商联系。
（五)注意事项
l.请控制判读时间,测试结果应在测定开始后20分钟左右读取，30分钟后读判定无效。
2。乳胶法乙肝五项检测试剂板(血清／血浆）只是定性的筛选乙肝病毒血清标志物的存在，不能确定血样中病毒的含量。
3.由于在技术上和操作上可能出现的失误，同时也由于标本中存在的干扰物质，检测结果可能有错误。对可疑结果应作相应的进一步检测。
（六)生物安全防护
1.在检测前,所有标本均应视为“阳性”标本即生物危险品.
2。如操作中不慎洒落血液，要及时对污染台面消毒处理。
3.操作前一定要做好自身防护（穿白大衣、带口罩、白帽、胶皮手套）.
4。HBV对低温、干燥、紫外线、70％乙醇均有耐受性。煮沸100℃10分钟、高压蒸汽灭菌121℃15分钟或f热160℃2小时均可灭活HBV.5～10g／L次氯酸钠30分钟，1：4000福尔马林37℃72小时，O 5%过氧乙酸15分钟均可破坏其传染性.
(七)临床意义
1。 HBsAg阳性：血清HBsAg阳性,表示受检者处于HBV的感染状态.HBsAg也可从许多乙肝检验对象体液和分泌物中测出，如唾液、精液、乳汁、阴道分泌物等。
2. HBsAh阳性：多见于乙型肝炎处于恢复期，或既往曾感染过HBV,现在已恢复，而且对HBV有一定的免疫力；同时，HBsAh阳性是对接种乙肝疫苗后产生效果，即接种免疫成功的指标。
3. HBeAg阳性：见于HBV感染的早期，表示血液中含有较多的病毒颗粒,提示肝细胞有进行性损害和高度传染性;乙型肝炎加重之前，HBeAg即有升高，有助于预测肝炎病情，HBeAg持续阳性，易转为慢性乙型肝炎；HBeAg和HBsAg均为阳性的孕妇,可以将乙型肝炎传播病毒给新生儿，其感染的阳性率为70％～90％。
4。 HBeAh阳性：多见于HBeAg转阴的检验对象,意味着HBV部分被清除或抑制，病毒复制减少，传染性降低；部分慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌检验对象可检出HBeAb；在HBsAg和HBsAh阴性时,如能检出HBeAh和HhcAh，也能确诊为乙型肝炎近期感染。
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5. HBcAh—lgG阳性:高滴度表示正在感染｝iBV，低滴度则是既往感染过HBV的指标，具有流行病学的意义。
6。 HBcAb-IgM阳性：是诊断急性乙型肝炎和判断病毒复制活跃的指标，并提示检验对象血液有较强传染性。同时，HBcAh—IgM阳性还见于慢性活动性乙型肝炎.
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