sumo的简单应⽤_简要介绍SUMO蛋⽩酶的作⽤以及使⽤说明SUMO蛋⽩酶是⾃E.coli表达经亲和纯化的重组蛋⽩酶，是⼀种具有较⾼活性的半胱氨酸蛋⽩酶。它能识别SUMO蛋⽩的三级结构，⽽不是氨基酸序列，因此可以⾼效⽽且特异性地将SUMO蛋⽩从重组融合蛋⽩上切割下来。染酸
阻塞密度SUMO蛋⽩酶的作⽤：
三相马达
SUMO蛋⽩酶以⼀种⾮常特异的⽅式切割蛋⽩，它特异性识别UBL蛋⽩的三级结构－SUMO，⽽不是氨基酸序列，故该蛋⽩酶可以切割重组融合蛋⽩的SUMO。切割的最佳温度为30℃，该酶作⽤温度和pH范围(pH7-9)都⽐较⼴泛。酶切后，可通过亲和纯化很容易地将SUMO 去除。SUMO蛋⽩酶在较宽范围的反应环境体系中能保持较⾼的活性，如温度(4-30℃)，PH (5.5-9.5)等，SUMO蛋⽩酶带有多聚His标签，便于融合蛋⽩切割后利⽤亲和层析去除该蛋⽩酶。
SUMO蛋⽩酶的使⽤⽅法说明：
1. 10×SUMO Protease Buffer : 500mM Tris-HCl, 10mM DTT, pH 8.0。
2. SUMO蛋⽩酶与需要酶切的⽬的蛋⽩⽐例：1：100。
语音系统>漆雾净化器3. 酶切体系：
融合蛋⽩ 1000 μg
第一中文10×SUMO Protease Buffer 20μL
SUMO蛋⽩酶 2μL
ddH2O定容⾄ 1000μL
4. 酶切条件：推荐4℃酶切过夜，⽤户可以根据⾃⼰研究的⽬的蛋⽩进⾏摸索，以下酶切分析图⽚可供参考。
5. 酶切后可取少量样本进⾏SDS-PAGE分析，若要去除酶切后体系中的SUMO蛋⽩酶，可⽤His标签纯化树脂亲和层析。
SUMO蛋⽩酶的注意事项：
为达到最好的酶切效果，请保证重组蛋⽩为部分或完全纯化的蛋⽩。对于⼤部分融合蛋⽩，SUMO蛋⽩酶最理想的反应液中NaCl的浓度为150 mM。然⽽，根据实际情况可在100 mM～300mM之间调节NaCl的浓度以达到最佳的效果。请务必考虑到酶中的盐的浓度(终浓度为12.5 mM)和底物中盐的浓度。在进⾏酶切反应时，请选⽤合适的10X SUMO Buffer +/- Salt。 咪唑的浓度应低于150 mM，若⾼于该浓度会影响SUMO蛋⽩酶的活性。
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