葡萄糖 50 mM
EDTA 10 mM（pH 8.0）
Tris-HCl 25 mM（pH 8.0）
每瓶100 ml, 在121℃高温下蒸汽灭菌15 min，贮存于4℃。
碱变形法抽提质粒溶液II
NaOH 0.2 M
SDS 1 %
用5 M NaOH 和10 % SDS的储存液用前新鲜配制。
碱变形法抽提质粒溶液III
5M 醋酸钾 60 ml
冰醋酸 11.5 ml
无菌水 28.5 ml
STET
Tris-HCl 10 mM（pH 8.0）
NaCl 0.1 M
EDTA 1 mM（pH 8.0）
Triton X-100 5垃圾分类机％ （V/V）
TAE（1×）缓冲液
Tris-Ac 40 mM
EDTA 1 mM
TE 缓冲液
Tris-HCl 10 mM（pH 8.0）
EDTA 1 mM（pH 8.0）
1.2.1.7 转化后细菌质粒DNA的提取（碱裂解法）
从转化后恒温培养的平板上挑取单菌落，转到含有LB液体培养基（含AMP 50 µg/ ml）的试管中，37℃剧烈震摇8-12 h。
（1）在Eppendorf 管中加入1.5 ml菌液，12000 rpm 离心30 s，弃上清。 步进式开水机（2）加入初始菌液1/4倍体积的STET溶液，剧烈震荡，12000 rpm 离心30 s大灯清洗装置，弃上清。
（女厕老式沟槽式厕所3）将沉淀重悬于100 µL用冰预冷的溶液Ｉ中。（4）加入200 µL新配制的溶液Ⅱ，盖紧管口，颠倒离心管5次，以混合内容物。（5）加入150 µL预冷的溶液Ⅲ ，盖紧管口，颠倒离心管5次，待溶液Ⅲ在粘稠
的细菌裂解物中分散均匀，将管置于冰上5 min。
（6）12000 rpm离心5 min，将上清转移到另一离心管中。
（7）加入与上清液等量的酚:氯仿:异戊醇（25:24:1）， 振荡混匀， 12000 rpm离
心3 min，将上清转移到另一离心管中。
（8）加入2倍体积的无水乙醇，颠倒混匀，－20℃放置20 min。（9）12000 rpm离心5 min。（10）弃上清，用70%乙醇清洗沉淀，待乙醇挥发后，加入50 µLTE溶液（含RNase 20 µg/ml）。用1.0%琼脂糖凝胶(智能公交管理系统含1‰EB)电泳检验质粒DNA。
频率补偿
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