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用于Vero细胞的化学限定培养基添加剂、及其在培养细胞和扩增病毒中的用途的制作方法

用于vero细胞的化学限定培养基添加剂、及其在培养细胞和扩增病毒中的用途
技术领域
1.本技术涉及生物技术领域，具体地，本技术涉及用于vero细胞的化学限定培养基添加剂、及其在培养细胞和扩增病毒的方法中的用途，更具体地，本技术涉及用于培养vero细胞的化学限定培养基添加剂、扩增vero细胞或病毒的方法和疫苗。

背景技术：

2.新型冠状病毒肺炎灭活疫苗（又称vero细胞）是一种新型冠状病毒疫苗，适用于预防由新型冠状病毒感染引起的疾病。vero细胞下培养过程中，常需要在培养基中添加类似胎牛血清(fcs)或来源于动物、植物或者酵母的蛋白质水解物等蛋白添加剂，导致获得的vero细胞中含有其他蛋白成分（例如胎牛血清、蛋白质水解物等），将该vero细胞注射到动物机体内，存在引发不必要的免疫反应的风险。并且，针对来源于动物、植物或者酵母的蛋白质水解物，不同批次间的蛋白质水解物差异较大，其不利于细胞的增殖以及各细胞的蛋白表达。因此，继续开发一种新型的用于培养vero细胞的化学限定培养基添加剂。

技术实现要素：

3.本技术旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商业选择。为此，本技术的一个目的在于提出一种能够有效地用于对vero细胞进行培养的化学限定培养基添加剂。
4.由此，在本技术的一个方面，本技术提出了一种用于培养vero细胞的化学限定培养基添加剂，所述添加剂与mem培养基配合，所述添加剂包括：41重量份的l-丙氨酸，98重量份的l-盐酸精氨酸，32.5重量份的l-天门冬氨酸，31重量份的l-门冬酰胺，8重量份的l-半胱氨酸盐酸盐一水，27.5重量份的l-胱氨酸，47.5重量份的l-谷氨酸，292.5重量份的l-谷氨酰胺，23.08重量份的甘氨酸，24.5重量份的l-盐酸组氨酸一水，14重量份的l-羟脯氨酸，36重量份的l-异亮氨酸，39重量份的l-亮氨酸，50重量份的l-盐酸赖氨酸，15.5重量份的l-甲硫氨酸，
21重量份的l-苯丙氨酸，25.5重量份的l-脯氨酸，42重量份的l-丝氨酸，30重量份的l-苏氨酸，7.5重量份的l-氨酸，32重量份的l-缬氨酸，0.585 重量份的还原型谷胱甘肽，0.698 重量份的七水硫酸亚铁，0.765 重量份的七水硫酸锌，3.375 重量份的维生素c，39.713 重量份的氯化胆碱，3.668 重量份的d-泛酸钙，3.544 重量份的叶酸，42.307 重量份的肌醇，0.056 重量份的九水硝酸铁，1.406 重量份的氯化锂，6.188 重量份的柠檬酸，0.563 重量份的盐酸吡哆醛，5.378 重量份的烟酰胺，2.909 重量份的维生素b6，3.173 重量份的维生素b1，7.178 重量份的维生素b12，0.203 重量份的d-生物素，4.028 重量份的次黄嘌呤，0.140 重量份的亚油酸，0.473 重量份的硫辛酸，0.135 重量份的1，4-丁二胺，0.518 重量份的维生素b2，0.878 重量份的胸苷，0.585 重量份的对氨基苯甲酸，2.250 重量份的重组人胰岛素，0.008重量份的氢化可的松，1000 重量份的f68，2000 重量份的hepes，3000 重量份的无水葡萄糖，0.000150056重量份的氯化铝，0.000431411重量份的乙酸钡，0.00018757重量份的六水氯化钴，1.50056e-05重量份的四水氯化锰，
0.00056271重量份的氟化钠，0.000131299重量份的氯化亚锡，0.000131299重量份的氯化镉，5.6271e-05重量份的二氧化锗，0.00375重量份的亚硒酸钠，0.00075028重量份的九水偏硅酸钠，1.8757e-05重量份的氯化镍，3.7514e-05重量份的偏钒酸铵，4.69e-06重量份的溴化钾，1.50056e-05重量份的碘化钾，7.50e-07重量份的氯化铷，9.3785e-06重量份的钼酸铵，5.63e-07重量份的硝酸银。
5.发明人经过大量试验对培养vero细胞的化学限定培养基添加剂（简称添加剂）进行优化和调整，未发现化学限定培养基添加剂各配方之间的规律，结果也是无法预测的。然而，当采用该添加剂和mem培养基配合得到的化学限定培养基培养vero细胞，可有效地实现细胞扩增或细胞培养，缩短倍增时间；并且，本技术的化学限定培养基添加剂中不含血清和蛋白，进行vero细胞或病毒扩增、尤其是病毒疫苗的扩增生产，获得的产品不含有其他蛋白成分，可降低血清等动物源性添加物的安全风险，并减少生产过程中其他蛋白对病毒疫苗纯化制剂的压力，更适合工业化生产。
6.需要说明的是，本文中的“化学限定培养基”是指化学成分完全明确，组成和浓度固定的培养基。含有本技术添加剂的化学限定培养基具有批间差异小、可重复性强、结果稳定、无动物源风险等优点。
7.根据本技术的实施例，所述mem培养基的配方如下所示：原料名称mg/ll-丙氨酸8.9l-盐酸精氨酸126l-门冬酰胺13.2l-天门冬氨酸13.2l-胱氨酸31l-谷氨酸14.7l-谷氨酰胺292甘氨酸7.5l-盐酸组氨酸一水42l-异亮氨酸52l-亮氨酸52l-盐酸赖氨酸73l-甲硫氨酸15l-苯丙氨酸32
l-脯氨酸11.5l-丝氨酸10.5l-苏氨酸48l-氨酸10l-酪氨酸二钠盐无水52l-缬氨酸46苯酚红10二水氯化钙265氯化钾400无水硫酸镁98氯化钠6800一水磷酸二氢钠140d-无水葡萄糖1000d-泛酸钙1叶酸1氯化胆碱1肌醇2烟酰胺1盐酸吡哆醛1维生素b20.1维生素b11
8.在本技术的另一方面，本技术提出了一种扩增vero细胞的方法，其包括：将vero细胞接种在mem培养基中，所述mem培养基添加前述的添加剂；对所述vero细胞进行培养，以便实现对所述vero细胞的扩增。根据本技术的实施例，该方法具有较高的vero细胞扩增效率。
9.根据本技术的实施例，以所述mem培养基和所述添加剂的总体积计，所述l-丙氨酸的终浓度为41mg/l，所述l-盐酸精氨酸的终浓度为98mg/l，所述l-天门冬氨酸的终浓度为32.5mg/l，所述l-门冬酰胺的终浓度为31mg/l，所述l-半胱氨酸盐酸盐一水的终浓度为8mg/l，所述l-胱氨酸的终浓度为27.5mg/l，所述l-谷氨酸的终浓度为47.5mg/l，所述l-谷氨酰胺的终浓度为292.5mg/l，所述甘氨酸的终浓度为23.08mg/l，所述l-盐酸组氨酸一水的终浓度为24.5mg/l，所述l-羟脯氨酸的终浓度为14mg/l，所述l-异亮氨酸的终浓度为36mg/l，所述l-亮氨酸的终浓度为39mg/l，所述l-盐酸赖氨酸的终浓度为50mg/l，所述l-甲硫氨酸的终浓度为15.5mg/l，所述l-苯丙氨酸的终浓度为21mg/l，所述l-脯氨酸的终浓度为25.5mg/l，所述l-丝氨酸的终浓度为42mg/l，所述l-苏氨酸的终浓度为30mg/l，所述l-氨酸的终浓度为7.5mg/l，所述l-缬氨酸的终浓度为32mg/l，所述还原型谷胱甘肽的终浓度为0.585 mg/l，所述七水硫酸亚铁的终浓度为0.698 mg/l，所述七水硫酸锌的终浓度为0.765 mg/l，所述维生素c的终浓度为3.375 mg/l，所述氯化胆碱的终浓度为39.713 mg/l，所述d-泛酸钙的终浓度为3.668 mg/l，所述叶酸的终浓度为3.544 mg/l，所述肌醇的终浓度为42.307 mg/l，所述九水硝酸铁的终浓度为0.056 mg/l，所述氯化锂的终浓度为1.406 mg/l，所述柠檬酸的终浓度为6.188 mg/l，所述盐酸吡哆醛的终浓度为0.563 mg/l，
所述烟酰胺的终浓度为5.378 mg/l，所述维生素b6的终浓度为2.909 mg/l，所述维生素b1的终浓度为3.173 mg/l，所述维生素b12的终浓度为7.178 mg/l，所述d-生物素的终浓度为0.203 mg/l，所述次黄嘌呤的终浓度为4.028 mg/l，所述亚油酸的终浓度为0.140 mg/l，所述硫辛酸的终浓度为0.473 mg/l，所述1，4-丁二胺的终浓度为0.135 mg/l，所述维生素b2的终浓度为0.518 mg/l，所述胸苷的终浓度为0.878 mg/l，所述对氨基苯甲酸的终浓度为0.585 mg/l，所述重组人胰岛素的终浓度为2.250 mg/l，所述氢化可的松的终浓度为0.008mg/l，所述f68的终浓度为1000 mg/l，所述hepes的终浓度为2000 mg/l，所述无水葡萄糖的终浓度为3000 mg/l，所述氯化铝的终浓度为0.000150056mg/l，所述乙酸钡的终浓度为0.000431411mg/l，所述六水氯化钴的终浓度为0.00018757mg/l，所述四水氯化锰的终浓度为1.50056e-05mg/l，所述氟化钠的终浓度为0.00056271mg/l，所述氯化亚锡的终浓度为0.000131299mg/l，所述氯化镉的终浓度为0.000131299mg/l，所述二氧化锗的终浓度为5.6271e-05mg/l，所述亚硒酸钠的终浓度为0.00375mg/l，所述九水偏硅酸钠的终浓度为0.00075028mg/l，所述氯化镍的终浓度为1.8757e-05mg/l，所述偏钒酸铵的终浓度为3.7514e-05mg/l，所述溴化钾的终浓度为4.69e-06mg/l，所述碘化钾的终浓度为1.50056e-05mg/l，所述氯化铷的终浓度为7.50e-07mg/l，所述钼酸铵的终浓度为9.3785e-06mg/l，所述硝酸银的终浓度为5.63e-07mg/l。
10.根据本技术的实施例，所述培养为贴壁培养。
11.在本技术的又一方面，本技术提出了一种扩增病毒的方法，其包括：根据前述的扩增vero细胞的方法扩增病毒。
12.根据本技术的实施例，所述病毒包括选自狂犬病毒、流感病毒、冠状病毒、法氏囊病毒、登革热病毒、脑炎病毒、痘病毒、正粘病毒、副粘病毒、反向病毒、披膜病毒、黄病毒、肠道病毒、细小核糖核酸病毒、嵌沙样病毒、疱疹病毒、腺病毒、牛痘病毒、sars病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、慢病毒、罗斯河病毒、西尼罗河病毒、黄热病毒、fsme病毒、以及甲型肝炎病毒的至少之一。
13.在本技术的又一方面，本技术提出了一种疫苗，所述疫苗是通过下列方法获得的：根据前述的方法进行扩增病毒；和对所述病毒进行减毒或者灭活处理所述疫苗是根据前面所述的方法制备的。根据本技术的实施例，该疫苗中不含有其他蛋白成分，可降低血清等动物源性添加物的安全风险，具有安全性高的优点。
14.另外，在本技术的又一方面，本技术还提出了前述的疫苗在制备药物中的用途，所述药物用于或者预防病毒相关疾病。
15.本技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本技术的实践了解到。
具体实施方式
16.下面详细描述本技术的实施例，这些实施例是示例性的，旨在用于解释本技术，而不能理解为对本技术的限制。
17.在本文中，术语“包含”或“包括”为开放式表达，即包括本技术所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。
18.在本文中，术语“”是指用于获得期望的药理学和/或生理学效果。所述效果就
完全或部分预防疾病或其症状而言可以是预防性的，和/或就部分或完全治愈疾病和/或疾病导致的不良作用而言可以是性的。本文使用的“”涵盖哺乳动物、特别是人的疾病，包括：(a)在容易患病但是尚未确诊得病的个体中预防疾病或病症发生；(b)抑制疾病，例如阻滞疾病发展；或(c)缓解疾病，例如减轻与疾病相关的症状。本文使用的“”涵盖将药物或化合物给予个体以、治愈、缓解、改善、减轻或抑制个体的疾病的任何用药，包括但不限于将含本文所述化合物的药物给予有需要的个体。
19.下面将结合实施例对本技术的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本技术，而不应视为限定本技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
20.实施例11、配制培养基获取市售的mem培养基，具体参见表1。根据表2将添加剂添加至mem培养基中，分别得到培养基1和培养基2，其中，培养基1为采用本技术的添加剂制备的无血清培养基，培养基2为采用对照添加剂制备的无血清培养基。配制mem+10%血清的培养基作为血清培养基，同时配制市售商品培养基（健顺vero cd培养基）作为对照。
21.表1：mem培养基的配方原料名称mg/ll-丙氨酸8.9l-盐酸精氨酸126l-门冬酰胺13.2l-天门冬氨酸13.2l-胱氨酸31l-谷氨酸14.7l-谷氨酰胺292甘氨酸7.5l-盐酸组氨酸一水42l-异亮氨酸52l-亮氨酸52l-盐酸赖氨酸73l-甲硫氨酸15l-苯丙氨酸32l-脯氨酸11.5l-丝氨酸10.5l-苏氨酸48l-氨酸10l-酪氨酸二钠盐无水52l-缬氨酸46苯酚红10
二水氯化钙265氯化钾400无水硫酸镁98氯化钠6800一水磷酸二氢钠140d-无水葡萄糖1000d-泛酸钙1叶酸1氯化胆碱1肌醇2烟酰胺1盐酸吡哆醛1维生素b20.1维生素b11表2：培养基1和培养基2中各添加剂的配方和添加量表2续表：
2、细胞培养和检测在前面得到培养基1、培养基2、血清培养基和商品培养基后，按照下列方式对vero细胞进行培养：将vero细胞（p157）按照5
×
106cells接种于t75方瓶（透气盖），置于37℃、5％co2的培养箱内进行培养。培养3d后用tryple
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express enzyme (1x)胰酶进行消化计数，随即再按上述细胞数接种至t75方瓶中，进行连续传代，计算细胞倍增时间【细胞倍增时间（doubling time，又称dt），细胞倍增所需要的时间，是判断细胞生长是否旺盛的重要指标，可以用公式（dt=t*[lg2/(lgnt-lgn0)]）计算。t为培养时间，n0为接种细胞数，nt为t时间后的细胞数】。
[0022]
3、结果和分析培养基1、培养基2、血清培养基和商品培养基的细胞倍增时间的检测结果参见表3。结果发现，培养基1的平均dt时间为30.41h，血清培养基的平均dt时间为35.78h，倍增时
间平均缩短了17.66%，即为缩短了5.37h。培养基1和培养基2中添加剂的成分相同，但添加量有所不同，培养基2的dt时间比商品培养基增加了5%，然而培养基1的dt时间比商品培养基缩短了4.6%。
[0023]
表3：培养基1、培养基2、血清培养基和商品培养基的细胞倍增时间的检测结果综上，本技术的实施例可进一步证明，本技术的培养基1是经过大量的试验筛选得到的，且无规律可以遵循，培养基1中添加剂的各组分对于培养效果（例如dt时间）而言十分重要，尤其是可显著缩短倍增时间，提高vero细胞的培养效率。
[0024]
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、
ꢀ“
示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本技术的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0025]
尽管上面已经示出和描述了本技术的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本技术的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本技术的原理和宗旨的情况下在本技术的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

技术特征：

1.一种用于培养vero细胞的化学限定培养基添加剂，所述添加剂与mem培养基配合，其特征在于，所述添加剂包括：41重量份的l-丙氨酸，98重量份的l-盐酸精氨酸，32.5重量份的l-天门冬氨酸，31重量份的l-门冬酰胺，8重量份的l-半胱氨酸盐酸盐一水，27.5重量份的l-胱氨酸，47.5重量份的l-谷氨酸，292.5重量份的l-谷氨酰胺，23.08重量份的甘氨酸，24.5重量份的l-盐酸组氨酸一水，14重量份的l-羟脯氨酸，36重量份的l-异亮氨酸，39重量份的l-亮氨酸，50重量份的l-盐酸赖氨酸，15.5重量份的l-甲硫氨酸，21重量份的l-苯丙氨酸，25.5重量份的l-脯氨酸，42重量份的l-丝氨酸，30重量份的l-苏氨酸，7.5重量份的l-氨酸，32重量份的l-缬氨酸，0.585 重量份的还原型谷胱甘肽，0.698 重量份的七水硫酸亚铁，0.765 重量份的七水硫酸锌，3.375 重量份的维生素c，39.713 重量份的氯化胆碱，3.668 重量份的d-泛酸钙，3.544 重量份的叶酸，42.307 重量份的肌醇，0.056 重量份的九水硝酸铁，1.406 重量份的氯化锂，6.188 重量份的柠檬酸，0.563 重量份的盐酸吡哆醛，5.378 重量份的烟酰胺，2.909 重量份的维生素b6，3.173 重量份的维生素b1，7.178 重量份的维生素b12，
0.203 重量份的d-生物素，4.028 重量份的次黄嘌呤，0.140 重量份的亚油酸，0.473 重量份的硫辛酸，0.135 重量份的1，4-丁二胺，0.518 重量份的维生素b2，0.878 重量份的胸苷，0.585 重量份的对氨基苯甲酸，2.250 重量份的重组人胰岛素，0.008重量份的氢化可的松，1000 重量份的f68，2000 重量份的hepes，3000 重量份的无水葡萄糖，0.000150056重量份的氯化铝，0.000431411重量份的乙酸钡，0.00018757重量份的六水氯化钴，1.50056e-05重量份的四水氯化锰，0.00056271重量份的氟化钠，0.000131299重量份的氯化亚锡，0.000131299重量份的氯化镉，5.6271e-05重量份的二氧化锗，0.00375重量份的亚硒酸钠，0.00075028重量份的九水偏硅酸钠，1.8757e-05重量份的氯化镍，3.7514e-05重量份的偏钒酸铵，4.69e-06重量份的溴化钾，1.50056e-05重量份的碘化钾，7.50e-07重量份的氯化铷，9.3785e-06重量份的钼酸铵，5.63e-07重量份的硝酸银。2.一种扩增vero细胞的方法，其特征在于，包括：将vero细胞接种在mem培养基中，所述mem培养基添加权利要求1所述的添加剂；对所述vero细胞进行培养，以便实现对所述vero细胞的扩增。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，以所述mem培养基和所述添加剂的总体积计，所述l-丙氨酸的终浓度为41mg/l，所述l-盐酸精氨酸的终浓度为98mg/l，所述l-天门冬氨酸的终浓度为32.5mg/l，所述l-门冬酰胺的终浓度为31mg/l，所述l-半胱氨酸盐酸盐一水的终浓度为8mg/l，所述l-胱氨酸的终浓度为27.5mg/l，所述l-谷氨酸的终浓度为47.5mg/l，所述l-谷氨酰胺的终浓度为292.5mg/l，所述甘氨酸的终浓度为23.08mg/l，所述l-盐酸组氨酸一水的终浓度为24.5mg/l，所述l-羟脯氨酸的终浓度为14mg/l，所述l-异
亮氨酸的终浓度为36mg/l，所述l-亮氨酸的终浓度为39mg/l，所述l-盐酸赖氨酸的终浓度为50mg/l，所述l-甲硫氨酸的终浓度为15.5mg/l，所述l-苯丙氨酸的终浓度为21mg/l，所述l-脯氨酸的终浓度为25.5mg/l，所述l-丝氨酸的终浓度为42mg/l，所述l-苏氨酸的终浓度为30mg/l，所述l-氨酸的终浓度为7.5mg/l，所述l-缬氨酸的终浓度为32mg/l，所述还原型谷胱甘肽的终浓度为0.585 mg/l，所述七水硫酸亚铁的终浓度为0.698 mg/l，所述七水硫酸锌的终浓度为0.765 mg/l，所述维生素c的终浓度为3.375 mg/l，所述氯化胆碱的终浓度为39.713 mg/l，所述d-泛酸钙的终浓度为3.668 mg/l，所述叶酸的终浓度为3.544 mg/l，所述肌醇的终浓度为42.307 mg/l，所述九水硝酸铁的终浓度为0.056 mg/l，所述氯化锂的终浓度为1.406 mg/l，所述柠檬酸的终浓度为6.188 mg/l，所述盐酸吡哆醛的终浓度为0.563 mg/l，所述烟酰胺的终浓度为5.378 mg/l，所述维生素b6的终浓度为2.909 mg/l，所述维生素b1的终浓度为3.173 mg/l，所述维生素b12的终浓度为7.178 mg/l，所述d-生物素的终浓度为0.203 mg/l，所述次黄嘌呤的终浓度为4.028 mg/l，所述亚油酸的终浓度为0.140 mg/l，所述硫辛酸的终浓度为0.473 mg/l，所述1，4-丁二胺的终浓度为0.135 mg/l，所述维生素b2的终浓度为0.518 mg/l，所述胸苷的终浓度为0.878 mg/l，所述对氨基苯甲酸的终浓度为0.585 mg/l，所述重组人胰岛素的终浓度为2.250 mg/l，所述氢化可的松的终浓度为0.008mg/l，所述f68的终浓度为1000 mg/l，所述hepes的终浓度为2000 mg/l，所述无水葡萄糖的终浓度为3000 mg/l，所述氯化铝的终浓度为0.000150056mg/l，所述乙酸钡的终浓度为0.000431411mg/l，所述六水氯化钴的终浓度为0.00018757mg/l，所述四水氯化锰的终浓度为1.50056e-05mg/l，所述氟化钠的终浓度为0.00056271mg/l，所述氯化亚锡的终浓度为0.000131299mg/l，所述氯化镉的终浓度为0.000131299mg/l，所述二氧化锗的终浓度为5.6271e-05mg/l，所述亚硒酸钠的终浓度为0.00375mg/l，所述九水偏硅酸钠的终浓度为0.00075028mg/l，所述氯化镍的终浓度为1.8757e-05mg/l，所述偏钒酸铵的终浓度为3.7514e-05mg/l，所述溴化钾的终浓度为4.69e-06mg/l，所述碘化钾的终浓度为1.50056e-05mg/l，所述氯化铷的终浓度为7.50e-07mg/l，所述钼酸铵的终浓度为9.3785e-06mg/l，所述硝酸银的终浓度为5.63e-07mg/l。4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述培养为贴壁培养。5.一种扩增病毒的方法，其特征在于，包括：根据权利要求2~4任一项所述的方法扩增病毒。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述病毒包括选自狂犬病毒、流感病毒、冠状病毒、法氏囊病毒、登革热病毒、脑炎病毒、痘病毒、正粘病毒、副粘病毒、反向病毒、披膜病毒、黄病毒、肠道病毒、细小核糖核酸病毒、嵌沙样病毒、疱疹病毒、腺病毒、牛痘病毒、sars病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、慢病毒、罗斯河病毒、西尼罗河病毒、黄热病毒、fsme病毒、以及甲型肝炎病毒的至少之一。7.一种疫苗，其特征在于，所述疫苗是通过下列方法获得的：根据权利要求5~6任一项所述的方法进行扩增病毒；和对所述病毒进行减毒或者灭活处理。8.根据权利要求7所述的疫苗在制备药物中的用途，所述药物用于或者预防病毒相关疾病。

技术总结

本申请提出了一种能够有效地用于对Vero细胞进行培养的化学限定培养基添加剂，其不含血清和蛋白等成分，采用该添加剂与MEM培养基配合使用，可有效地实现细胞扩增或培养，可有效缩短倍增时间；并且，在进行Vero细胞或病毒扩增、尤其是病毒疫苗的扩增生产时，获得的产品不含有其他蛋白成分，可降低血清等动物源性添加物的安全风险，并减少生产过程中其他蛋白对病毒疫苗纯化制剂的压力，更适合工业化生产。产。