CHINA HEALTH INDUSTRY
造血干细胞移植是白血病、重症再生障碍性贫血、自身免疫性疾病如SLE 等各种造血和免疫系统疾病的有效方法。造血干细胞移植技术基本原理就是在给病人行大剂量放化疗前，首先将患者自身的造血干细胞或HLA相合供者从骨髓或外周血提取并保存起来，在给予病人大剂量放化疗后，再将预先保存的造血干细胞通过静脉回输于病人体内，这些回输后的“种子”可产生新的血细胞，也就是恢复了造血功能[1]。本文笔者通过造血干细胞移植(HSCT)患者外周血T、B淋巴细胞亚的动态监测来辅助对患者免疫功能重建的评价，现将材料分析如下。 1 资料与方法
捕鼠笼
1.1 一般资料
选择我院2008年1月至2010年2月收治入院接受HSCT的患者20例，所有患者移植前均明确诊断，急性白血病经传统联合化疗取得病情完全缓解并巩固2～4个疗程，其中，男11例次，女9例次，男女比例1∶1，最小年龄24岁，最大年龄46岁，平均年龄(30.6±2.1)岁，其中，急性白
血病11例次(自体移植7例次)、慢性粒细
糖炒栗子机胞白血病8例次、重症再生障碍性贫血1例
次。20例正常对照者为参照研究对象,2组
年龄，性别等一般资料无显著性差异，具
有可比性。
1.2 实验器材与试剂
淋巴细胞及其亚的检测用Beckman
-Coulter公司的EPICS-XL型流式细胞
仪进行荧光抗体标记检测。取患者的新鲜
抗凝血标本100ttL放入样品测定管，加入
相应的荧光标记的单克隆抗体，振荡混匀
后室温避光孵育20min，每管加入500vL
Optilyse C(溶血素)，振荡混匀，室温下溶
血8min。溶血完毕，加入2mLPBS,1500r
／rain洗2次。加入1mL PBS混匀，立刻
上机检测。所用单抗为CD3、CD4、CD8、
CDl9和HLA.DR，均购自Immunotech公
司。
1.3 监测方法
采用流式细胞学技术分别于造血干
细胞动员前，移植后2周,1、3、6、9、12及18
个月共8个时间窗监测受试者体内的淋巴
细胞、T细胞(CD3+)、B细胞(CD19+)、Th
细胞(CD3+CD4+)、Tc细胞(CD3+CD8+)
的变化。
1.4 统计学分析
采用SPSS l4.0软件包进行统计学
处理，数据使用均数±标准差(x±s)表
示,P<0.05认为有显著性差异。
2 结果
20例干细胞移植患者中，急性白血病
11例次(自体移植7例次)、慢性粒细胞白
血病8例次、重症再生障碍性贫血1例次。
干细胞移植前的淋巴细胞各亚均明显
低于正常人,P＜0.01。T、B细胞各亚均
于移植后2周降低至较低水平，随后逐渐
升高。其中B细胞在移植后9个月内逐渐
恢复至正常水平，随后至18个月内基本平
稳。T细胞亚恢复稍慢，于18个月内基
本恢复正常水平，其中CD8+T细胞分别
在1个月至3个月时较明显高于正常水平,
随后逐渐下降，在12个月时逐渐恢复至正
常水平，至18个月时基本平稳。CD4+T细
胞恢复迟于CD8+T细胞。血干细胞移植
前的淋巴细胞各亚均明显低于正常人
T、B淋巴细胞亚监测对造血干细胞移植后患者免疫功能重建的评价的临床研究
梁惠如 李斌 梁玉环 李小胡 梁永生
(江门市中心医院 广东江门 529000)
【摘要】目的 探讨造血干细胞移植(HSCT)患者外周血T、B淋巴细胞亚监测对患者免疫功能重建的评价的临床价值。方法选择20例接受造血干细胞移植患者为研究对象，同时选择我院同期健康体检者20名作为正常对照。20例患者采移植前及移植后2周血常规白细胞数>1×109/L外周静脉血3～5mL，分离出T、B淋巴细胞，通过RT-PCR方法检测各细胞亚的表达水平。结果移植前患者机体的淋巴细胞各亚均明显低于正常人(P<0.01)，原因可能与疾病本身及后续尤其联合化疗密切相关。T、B细胞各亚均于移植后2周降低至较低水平，随后逐渐升高。其中B细胞在移植后9个月内逐渐恢复至正常水平，随后至18个月内基本平稳。T细胞亚恢复稍慢，于18个月内基本恢复正常水平，其中CD8+T细胞分别在1个月至3个月时较明显高于正常水平，随后逐渐下降，在12个月时逐渐恢复至正常水平，至18个月时基本平稳。CD4+T细胞恢复迟于CD8+T细胞。结论血液病患者造血干细胞移植前即存在淋巴细胞亚的异常，于移植后12～18个月内基本恢复正常水平，其中植后B细胞较先恢复,T细胞亚恢复稍慢。提示大部分患者免疫功能于移植后12～18个月内基本恢复正常水平，这与临床实践经验基本相符：造血干细胞移植约1年后机体发生严重感染的几率明显下降。
【关键词】T、B淋巴细胞亚 造血干细胞移植 免疫功能重建
【中图分类号】R457.7 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5654(2011)05(a)-0079-02
类别前
后健康对照组2周1月3月6月9月12月18月
CD19+(73±108)*(11±4)*(152±144)*(168±134)*223±270278±199344±111368±87260±69
CD3+CD4+(402±189)*(99±69)*(201±97)*(444±365)*(440±199)*(501±333)*670±389790±338848±289
CD3+CD8+334±277(302±265)*(1077±499)*(910±599)*744±311669±299606±380590±188578±176注:﹡P均＜0.01
表1 移植前后T、B淋巴细胞亚的结果比较(x±s)
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中国卫生产业·第八卷·第五期 79
P<0.01，见表1。
3 讨论
随着移植技术的不断完善、创新，造血干细胞移植已经成为根治血液病尤其是恶性血液病的最有效方法，其有效率不断提高，造福广大患者。造血干细胞移植尤其异基因移植(Allo-HSCT)相当于重建患者造血与免疫系统，而移植成功后需重点防治两方面风险：移植物抗宿主病(GVHD)及免疫功能低下继发各种感染情况。故移植后患者免疫功能的有效恢复显得至关重要。众所周知，人体免疫系统一般分细胞免疫及体液免疫，其中淋巴细胞重点参与体液免疫功能。相关研究显示，淋巴细胞各亚的动态平衡与机体免疫功能状态密切相关，故本研究拟通过对造血干细胞移植患者移植前后等各时间窗口T、B淋巴细胞亚的动态监测，以探讨造血干细胞移植后患者机体免疫功能的恢复情况。本研究样本各移植前患者机体的淋巴细胞各亚均明显低于正常人(P<0.01)，原因可能与疾病本身及后续尤其联合化疗密切相关。T、B细胞各亚均于移植后2周降低至较低水平，随后逐渐升高。其中B细胞在移植后9个月
内逐渐恢复至正常水平，随后至18个月内
基本平稳。T细胞亚恢复稍慢，于18个
月内基本恢复正常水平，其中CD8+T细
胞分别在1个月至3个月时较明显高于正
常水平，随后逐渐下降，在12个月时逐渐
恢复至正常水平，至18个月时基本平稳。
CD4+T细胞恢复迟于CD8+T细胞。提示
大部分患者免疫功能于移植后12～18个
月内基本恢复正常水平，这与临床实践经
验基本相符：造血干细胞移植约1年后机
体发生严重感染的几率明显下降。当然,
机体免疫系统是复杂、多变的,T、B淋巴
细胞亚的动态平衡仅是其中一个方面,
且移植后T、B淋巴细胞亚的动态改变
与GVHD、继发感染甚至疾病复发的关系
有待进一步研究。
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【收稿日期】2011-04-13
肿瘤之一种，据资料统计，肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)占90%强。每年全球有超过62.6万的肝癌患者产生，其中大约35万患者发生在我国[1]，肝癌居我国各种癌症致死率的第二位[2]。由于肝癌患者一般发现较晚，发现时一般处于中晚期，经后的原发性肝细胞癌患者术后复发率也较高，同时肝癌者术后复发成为了肝癌致死的首要原因。有国外资料报道[3]，肝细胞癌患者术后2年内的复发率大约为70%，我国吴孟超等[4]报道肝癌术后3年复发率高达57%～81%。一般肝癌患者发病比较隐匿，早期无明显临床症状，患者感觉有异常就诊时，多已失去了根治的最佳时机，而肝癌的 诊断直接关系到患者的和预后，及早发现及早，可以延长患者的生命，提高肝癌患者效果，且改善患者预后。因此提高对肝癌患者的早期诊断水平对肝癌患者具有重要临床意义。HBV病毒感染是导致肝细胞肝癌的重要病因。香港学者创立了肝癌危险评级系统，并通过10年随访揭示了可有效预测HBV携带者的HCC发病关联性。也有专家建议：每6个月监测肝癌中高危
人，并加以适宜的干预措施，可大大提
高肝癌患者的早期诊断率。人们对肝癌的
认识在逐步加深，同时实验室检查技术和
设备以及影像诊断技术和设备的不断提
转子动平衡高，大大提高了肝癌早期诊断率，从而使
得肝癌的整体水平提高。一般影像学
技术能准确诊断大部分原发性肝癌和肝
癌术后复发患者，但是这些技术对于诊断
三通截止阀有无远处转移的价值有限。～(18)F-FDG
PET／CT检查技术提供了良好的分子生
物学的功能图像，能真实反映肝组织代谢
情况，同时可以提供解剖与功能相关的代
谢信息，已被广泛用于对恶性肿瘤的诊断
及评价恶性肿瘤疗效方面[5～6]。本组
研究资料显示:～(18)F-FDG PET／CT
和增强CT两者联用，在临床上对原发性
肝癌患者及肝癌术后复方的诊断准确性
比较好，值得临床推广。
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【收稿日期】2011-04-20
(上接78页)
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