桤叶唐棣(Amelanchier alnifolia Nutt.)又名Saskatoon
berry ，历史上被称为“鸽莓”，是蔷薇科(Rosaceae )唐棣属的落叶灌木或小乔木，高1.5~3.0m ，果实为小浆果，为北美洲重要的经济林树种，是国际市场新兴的第三代水果的代表[1]。自1999年承担国家林业局“948”项目的辽宁省干旱地区造林研究所从加拿大成功引种桤叶唐棣后，其展现出良好的发展前景。鉴于桤叶唐棣扦插繁殖和种子育苗皆较困难的现实情况，开展了组培快繁的研究，迄今已实现关键技术的突破，为工厂化育苗奠定了基础。现将桤叶唐棣组培育苗技术总结如下。
1所需设备及化学试剂
组培实验室必须选建在安静、清洁、无污染的地方，接种设备包括超净工作台、解剖刀、镊子、酒精灯、医用小推车、广口瓶、白瓷碟、无菌滤纸；灭菌设备包括高压蒸汽灭菌锅、紫外线灯、烘干箱；灭菌药剂及辅助剂包括75%C 2H 6O 、 90%C 2H 6O 、0.1%HgCl 2、高锰酸钾、甲醛、84消毒液、洗衣粉、餐洗净等；培养基及植物生长调节剂包括MS 培养基、6-BA 、NAA 、IBA 、白糖、琼脂等；培养设备包括300mL 培养瓶、培养架、空调、照明灯管；其他辅助试验设备包括冰箱、电子天平(0.01mg 、0.001mg )、磁力搅拌器、酸度计、照度计、温湿度表、移液、移液管、试剂瓶、容量瓶、烧杯等。2生产环境及设备消毒灭菌2.1 培养瓶清洗与消毒
将使用过的培养瓶或盛培养基和培养物的玻璃器皿中的污物倒掉，再浸入水中进行洗涤。有微生物污染的器皿，必须先进行高压消毒或煮沸，杀死菌体后放入水中洗涤。器皿洗净后，烘干或晾干，放在规定的地方以待取用。2.2
接种器械灭菌海绵真空吸盘
一是高压蒸汽灭菌。使用前，将接种器械、器皿及定性滤纸用牛皮纸包裹后，再用聚丙烯薄膜裹紧并包扎，然后与分装后的培养基一起放入高压锅的消毒桶内灭菌。锅内灭菌物以不超过灭菌锅容量的3/4为宜，高压灭菌时锅内使用蒸馏水。打开电源加热，压力保持在0.105~0.120MPa (压力<0.140MPa )，时间为30min 。二是灼烧灭菌。在无菌操作时,
DEWARP流量测量装置将镊子、剪刀、解剖刀等浸入250~500mL 装有75%C 2H 6O 的广口瓶中，使用之前取出并在酒精灯外焰处灼烧灭菌，冷却后立即使用。每次重新操作都要将工具放在火焰上消毒。2.3
准备室消毒
>toubai坚持每天用84消毒液(稀释成1000倍液)或75%
C 2H 6O 喷洒、洗涤准备室地面，保持室内清洁。
2.4接种室及培养室消毒灭菌
房间密闭，将甲醛5~38mL/m 3置于广口容器中，加高锰
酸钾5g/m 3氧化挥发，熏蒸2~3d ，通风无味后2~3d 人员方可进入。接种室每30d 用高锰酸钾及甲醛混合熏蒸1次，培养室每60d 用高锰酸钾及甲醛混合熏蒸1次。工作期间每3d 用75%C 2H 6O 喷雾消毒1次。转接操作前，接种室、超净工作台等皆要用紫外线灯照射25~30min 。3
无菌操作
入无菌室前洗手，去掉指甲中的污物；入室时要穿戴上经过消毒的工作服、帽子、口罩和鞋子等；工作人员进行无菌操作前，要用75%C 2H 6O 擦洗双手，并用75%C 2H 6O 擦拭操作台台面及内壁；操作中要经常用75%C 2H 6O 擦洗手。操作时，右手拿培养瓶，左手轻轻拉开瓶口绑绳放在台面上，再用左手中指和无名指夹住封口膜后掀开，将培养瓶口倾斜靠近酒精灯火焰上旋转灼烧数秒，用灼烧消毒冷却后的镊子将转接材料接种至培养基中，每个培养容器中接种小芽丛或单芽3~4株，且分布均匀，接种后盖上封口膜包扎，并标注日期；接种时，在无菌滤纸上切取材料，刀和镊子等接种工具每次使用后即放入75%C 2H 6O 中浸泡，然后灼烧放凉备用。接种时，超净工作台上的风机要始终保持开启状态，确保通风顺畅；操作过程中不准讲话，亦不准对着操作
区呼气。每次接种完毕后，用75%C 2H 6O 将工作台台面及内壁擦拭干净，并将接种器皿及接种工具重新进行消毒处理。4
培养基制作
4.1培养基母液的配制与保存
选用试剂纯度为化学纯或分析纯的化学药品，根据MS 培养基配方，分别配制大量元素(10倍)、微量元素(100倍)、铁盐(100倍)、有机物(100倍)，母液配制使用蒸馏水或去离子水。配制好的培养基母液要分别贴上标签，标注名称、配制倍数和日期，置于2~4℃环境下保存。铁盐应储存在棕容器中。
4.2植物生长调节剂母液的配制与保存
桤叶唐棣组培中用到的植物生长调节剂有NAA 、IBA 和6-BA 。配制NAA 、IBA 母液时，可先用少量95%C 2H 6O 溶解,
再加蒸馏水定容；配制6-BA 母液时，可先用少量0.1mol/L HCl 溶解，再加蒸馏水定容。母液配制好后储存在棕容器
中，贴好标签并置于冰箱内保存，温度控制在0~4℃之间。4.3培养基的配制尧灭菌及保存
根据培养基配方需求，称取琼脂(8g/L )、白糖(30~35g/L ),
摘要本文对桤叶唐棣组培育苗技术进行了全面总结，包括所需设备及化学试剂、生产环境及设备消毒灭菌、无菌操作、培养基制作、外植体处理、组织培养程序、炼苗、移栽、移栽后管理和定植等方面内容，以期为优良外来经济林树种的快繁提供技术参考。
多媒体控制器关键词桤叶唐棣；组培；育苗技术中图分类号S792.99文献标识码B 文章编号1007-5739(2019)03-0125-02
桤叶唐棣组培育苗技术
王希大
(辽宁省清原县夏家堡林场，辽宁清原113300)
收稿日期
2018-11-07
林业科学
现代农业科技2019年第3期125
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议