样品和试剂：
β2µ球蛋白：分子量11.8kDa 浓度：100 µg/ml.
β2µ球蛋白抗体：分子量150kDa 浓度：1 mg/ml
偶联试剂：10 mM Sodium acetate buffer, pH 4.0，4.5，5.0， 5.5新型助听器
仪器运行缓冲溶液：HBS-EP Buffer乌苏里蝮
再生试剂：Glycin-HCl, pH 2.5
一、芯片表面预处理
使用氨基偶联试剂盒偶联β2µ球蛋白抗体在CM5传感芯片的2通道上
1. 运行Application Wizard –Surface Preparation – immobilization PH
Scouting 自动化程序进行预偶联，到合适偶联pH。
样品准备：分别使用pH 4.0，4.5，5.0， 5.5的10 mM Sodium acetate buffer溶解β2µ球蛋白抗体，稀释到20µg/ml。
immobilization PH Scouting 预偶联操作
结果：pH5.0为最合适的偶联pH
2. 运行Application Wizard –Surface Preparation – immobilization自动化程序
进行氨基偶联
样品准备：使用pH 5.0 10 mM Sodium acetate buffer溶解β2µ球蛋白抗体，稀释到20µg/ml。
实验操作请参考如下视频
immobilization 氨基偶联操作
结果：偶联量为14387.2
二．进样分析和再生
使用HBS-EP Buffer稀释β2µ球蛋白，稀释到1µg/ml和100ng/ml，体积至少
200µl，流速10µl/min，进样时间3min。
再生试剂Glycin-HCl, pH 2.5，时间30s。
1. 运行Application Wizard –Binding Analysis自动化程序进行分析物进样
实验操作请参考如下视频
Binding Analysis 结合分析操作
结果：100ng/ml β2µ球蛋白的结合量为 261.8RU 1µg/ml β2µ球蛋白的结合量为 952.4RU 说明分析物与配体有结合并有浓度剂量关系。
cpich
怎么扣出水指法图100ng/ml β2µ球蛋白
1µg/ml β2µ球蛋白
2. 运行手动操作程序Run – Run Sensorgram，对两个样品进样分析，流速
10µl/min，进样时间3min。
手动操作程序的使用请参考如下文档
Run Sensorgram 手动实验操作
股骨头仪结果：100ng/ml β2µ球蛋白的结合量为 267.1RU
1µg/ml β2µ球蛋白的结合量为 954.3RU
说明实验结果的重复性很好
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