傅永红， 李红玉， 张春江， 员田
【关键词】 十八味诃子利尿丸；,,抑菌活性；,,最小抑菌浓度 摘要：目的研究藏药十八味诃子利尿丸体外抑菌活性。方式用琼脂扩散法和微量稀释法研究其抑菌圈和最小抑菌浓度（MIC）。结果十八味诃子利尿丸具有抑制金黄葡萄球菌、耐药表皮葡萄球菌、非耐药表皮葡萄球菌、粪肠球菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单孢杆菌、白念珠菌的生长繁衍的活性，另外不同溶剂解药品抑菌性有必然不同。结论十八味诃子利尿丸对临床分离的白念珠球菌和耐药表皮葡萄球菌有较强的抑制作用，具有较高的临床应用价值。 生产圆珠笔
关键词：十八味诃子利尿丸； 抑菌活性； 最小抑菌浓度
Abstract：ObjectiveTo investigate the inhibitory effects of Shibawei Heziliniao pill on microbe in zone and minimum inhibitory concentration (MIC) were examined by using MH agar plates ,PDA agar plates and was shown that Shibawei Hezilinao pill has strong bacter
iostasis inhibition to the growth of Staphlococcus aureus ATCC25923,Escherichia coli ATCC25922,Pseudomonas aeruginosa ATCC2785,Bacillus subtilis, methicillinresistant Staphylococcus epidermidis ,Candida albicans,methicillinsensitive Staphylococcus aureus,Bacillus cereus,Enterococccus faecalis,besides the inhibitory effect of microbe were different when Shibawei pill was extracted with different solution. ConclusionShibawei Heziliniao pill has obvious antibacterial activity to clinically isolated strains Candida albicans and methicillinresistant Staphylococcus epidermidis,thus it is possible to be applied to clinical therapy.
Key words：Shibawei Heziliniao pill; Antibacterial activity; MIC
最近几年来细菌性感染疾病日渐增加，细菌耐药性问题已成为21世纪全世界关注的热点［1］。大多数现代抗菌药物活性成份单一，而且存在开发难本钱高耗时长等困难。为此国内外很多学者都把目标转向对人体毒副作用小，易于代谢，且不易产生耐药性的中草药。藏医药学是中国医药学宝库中的璀璨明珠，具有悠长的历史和丰硕的蕴藏。藏药大多取材于高原地域的动植物和矿物石。这些药材资源长期生存于高原地理环境，增进了其体内具
有特有的多种次生代谢产物的生长和复杂矿物的形成［2］。这些物质往往具有独特的抗菌功效，因此藏药是具有广漠前景的抗菌研究新生方向的药物。十八味诃子利尿丸是传统的藏药复方，要紧成份为诃子（去核）、红花、豆蔻、余甘子、姜黄、小檗皮、蒺藜、金门石、刺柏、刀豆、熊胆、人工牛黄等18味，有利肾固精、利尿的功效。用于肾病、腰肾疼痛、尿频、小便浑浊、糖尿病等症的临床医治［3］。其中诃子（去核）、豆蔻、余甘子、姜黄、小檗皮、蒺藜、刺柏、人工牛黄等具有必然的清热解毒、抑制病毒的作用［4］。清热解毒药物属中医祛邪疗法之一，这种药物多用于恶性肿瘤热证、实证、瘟病时疫等［5］。现代中药药理研究说明：清热解毒类药一样具有较广的抗菌谱，能抑制病毒，提高机体非特异性免疫力，对肿瘤细胞有抑制作用，具有消炎止痛、杀菌、抑癌、排毒和退热等作用。藏药生境独特，药理功效强，其临床疗效引发国内外的关注和日趋重视［6］。目前对藏药的药理研究很少，对清热解毒复方的体外抑菌作用大体没有研究报导。为了探讨藏药复方十八味诃子利尿丸发挥药理作用的机理，说明该药益肾利尿的作用机制以充分开发其药物利用价值，咱们进行了十八味诃子利尿丸体外抗菌实验研究。现将结果报告如下。
1 材料与方式
药品十八味诃子利尿丸由甘肃省甘南藏族自治州佛阁藏药提供，药品批号050801。
金属包覆垫片 菌种标准菌株：金黄葡萄球菌（Staphylococcus aureus）ATCC25923，大肠杆菌（Escherichia coli)ATCC25922，铜绿假单孢杆菌（Pseudomonas aeruginosa）ATCC2785。临床分离菌株：枯草芽炮杆菌（Bacillus subtilis），蜡状牙孢杆菌（Bacillus cereus），耐药表皮葡萄球菌（methicillinsesistant Staphylococcus epidermidis)，白念珠菌（Candida albicans），非耐药表皮葡萄球菌（methicillinsensitive Staphylococcus aureus）,粪肠球菌（Enterococcus faecalis）。以上菌株均由甘肃省临床查验中心提供。
音频切换器 培育基MH琼脂培育基、PDA培育基、牛肉膏蛋白胨培育基（购于中国药品生物制品鉴定所）。 鸟笼灯 药液的制备别离用100%DMSO，50%DMSO和无菌水溶解十八味诃子利尿丸并配制药品浓度为100，50，10 mg・ml-13个梯度。
菌液制备取实验菌种于1 ml无菌始菌悬液中，吹打均匀；菌悬液a：吸取初始菌悬液50 μl于950 μl生理盐水中混匀，调剂菌液浓度为106CFU（colony forming unit，CFU）/ml，用
dingx于抑菌圈测定；菌悬液b：吸取初始菌悬液500 μl于10 ml牛肉膏蛋白胨中培育基中，调剂菌液浓度为106CFU（collonyforming unit ,CFU）/ml，用于最小抑菌浓度（MIC）的测定。
抑菌圈测定无菌条件下取菌悬液a 200 μl滴加于MH琼脂培育基和 PDA培育基（用于白念珠菌）表面，涂布均匀，放置牛津杯，待菌液浸入且牛津杯吸附后加100 μl用100%DMSO，50%DMSO和无菌水溶解浓度为100，50，10 mg・ml-1的十八味诃子利尿丸药样于牛津杯中，置37℃培育箱培育24 h（白念珠球菌30℃培育48 h），测定抑菌直径DD。
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