宋淑范，王迪，陈德才
沈阳市第四人民医院，沈阳110031
摘要：目的探讨转移抑制性长链非编码RNA （lncRNA LIMT ）对肺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法取肺癌
A549细胞，分别转染lncRNA LIMT 过表达质粒pEGFP -C1-LIMT 及其空质粒pEGFP -C1-NC 、敲减质粒siRNA -LIMT 及其空质粒siRNA -NC ，并相应作为pEGFP -C1-LIMT 组、pEGFP -C1-NC 组、siRNA -LIMT 组、siRNA -NC 组。分别应用CCK -8增殖、细胞流式试验观察各组细胞增殖凋亡能力，采用RT -qPCR 法检测lncRNA LIMT 表达，Western boltting 法检测各组EGFR -ERK 信号通路关键分子蛋白表达水平。结果
pEGFP -C1-LIMT 组A549细胞增殖能力低于pEGFP -
C1-NC 组，siRNA -LIMT 组A549细胞增殖能力高于siRNA -NC 组（P 均<0.05）。pEGFP -C1-LIMT 组A549细胞凋亡比例
电石发气量
高于pEGFP -C1-NC 组，siRNA -LIMT 组A549细胞凋亡低于siRNA -NC 组（P 均<0.05）。lncRNA LIMT 水平pEGFP -C1-LIMT 组高于pEGFP -C1-NC 组，siRNA -LIMT 组低于siRNA -NC 组（P 均<0.05）。pEGFP -C1-LIMT 组A549细胞EGFR 、
p -ERK 蛋白低于pEGFP -C1-NC 组，p -EGFR 、ERK 蛋白高于pEGFP -C1-NC 组（P 均<0.05）；siRNA -LIMT 组A549细胞EGFR 、p -ERK 蛋白高于siRNA -NC 组，p -EGFR 、ERK 蛋白低于siRNA -NC 组（P 均<0.05）。结论
lncRNA LIMT 可以抑制
肺癌细胞的增殖，促进肺癌细胞凋亡，其机制可能与lncRNA LIMT 调控EGFG -ERK 信号有关。
关键词：肺肿瘤；细胞增殖；细胞凋亡；转移抑制性长链非编码RNA doi ：10.3969/j.issn.1002-266X.2021.13.011中图分类号：R734.2
文献标志码：A
文章编号：1002-266X （2021）13-0042-04
Effects of metastasis inhibitory long non -coding RNA on proliferation and apoptosis of lung cancer cells SONG Shufan ，WANG Di ，CHEN Decai
Shenyang Fourth People's Hospital ，Shenyang 110031，China
Abstract ：Objective
To investigate the effect of metastasis inhibitory long non -coding RNA （lncRNA LIMT ）on
proliferation and apoptosis of lung cancer cells.Methods
Lung cancer A549cells were transfected with lncRNA LIMT
overexpression plasmid pEGFP -C1-LIMT and its empty plasmid pEGFP -C1-NC ，knockdown plasmid siRNA -LIMT ，and its empty plasmid siRNA -NC ，which were taken as the pEGFP -C1-LIMT group ，pEGFP -C1-NC group ，siRNA -LIMT group ，and siRNA -NC group.The proliferation and apoptosis abilities of each group were observed by CCK -8proliferation test and flow cytometry ，respectively.The expression of lncRNA LIMT was detected by RT -qPCR ，and the protei expres⁃sion levels of key molecules in EGFR -ERK signaling pathway were detected by Western blotting.Results
The prolifera⁃
tion ability of A549cells in the pEGFP -C1-LIMT group was significantly lower than that of pEGFP -C1-NC group ，and the proliferation ability of A549cells in the siRNA -LIMT group was significantly higher than that of siRNA -NC group （both P <
0.05）.The proportion of apoptosis of A549cells in the pEGFP -C1-LIMT group was significantly higher than that of pEG⁃FP -C1-NC group ，and the apoptosis of A549cells in the siRNA -LIMT group was significantly lower than that of the siRNA -NC group （both P <0.01）.The level of lncRNA LIMT in the pEGFP -C1-LIM group was higher than that in the pEGFP -C1-NC group ，and that in siRNA -LIMT group was lower than that in the siRNA -NC group （all P <0.05）.The EGFR and p -ERK protein expression levels of A549cells in the pEGFP -C1-LIMT group were lower than those in the pEGFP -C1-NC group ，while p -EGFR and ERK protein expression levels were higher than those in the pEGFP -C1-NC group （all P <0.05）.The protein levels of EGFR and p -ERK in siRNA -LIMT group were higher than those in the siRNA -NC group ，and
the protein levels of p -EGFR and ERK were lower than those in the siRNA -NC group （all P <0.05）.Conclusion
Ln⁃
cRNA LIMT can inhibit the proliferation of lung cancer cells and promote the apoptosis of lung cancer cells ，and the mech⁃
电风扇扇叶基金项目：辽宁省自然科学基金指导计划项目（20170540565）。
开放科学（资源服务）
标识码（OSID ）
42
anism may be related to the regulation of lncRNA LIMT on EGFR-ERK signal.
Key words：lung neoplasms；cell proliferation；apoptosis；metastasis inhibitory long non-coding RNA
肺癌是临床上最常见的恶性肿瘤，其发病率和病死率均位居肿瘤性疾病的首位［1］。目前，肺癌的效果仍不甚满意，其5年生存率低于20%；因此研究肺癌的发病机制对于制定肺癌预防策略，探究新的方法具有重要意义［2］。长链非编码RNA （lncRNA）是一类长度超过200nt的内源性非编码的RNA分子，它可以通过改变染体构象、改变基因转录、基因翻译等起到调控基因表达的作用
［3］。转移抑制性长链非编码RNA（lncRNA LIMT）是一种定位于12号染体的lncRNA，具有7个外显子序列［4］。已有研究显示，在乳腺癌、肝癌中存在ln⁃
cRNA LIMT的低表达，其水平与患者预后相关，但在肺癌中的作用及机制仍未完全明确［5-6］。本研究探讨lncRNA LIMT对肺癌细胞增殖及凋亡的影响，旨在为肺癌提供新的研究思路。
1材料与方法
1.1材料RPMI1640培养基，购自Gibco公司；Li⁃ofectamine2000，购自Invitrogen公司；lncRNA LIMT 过表达质粒pEGFP-C1-LIMT、空质粒pEGFP-C1-NC、敲减质粒siRNA-LIMT及其siRNA-NC，均购自于广州市锐博生物科技有限公司；CCK-8细胞增殖实验试剂盒，购自于北京全式金生物有限公司；An⁃nexin V-FITC/PI双染凋亡试剂盒，购自于凯基生物有限公司；表皮生长因子受体（EGFR）蛋白一抗、磷酸化EGFR（p-EGFR）蛋白一抗、细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）蛋白一抗、磷酸化ERK（p-ERK），购自于武汉三鹰公司。
1.2方法
1.2.1细胞培养取冻存的人肺癌A549细胞，进行细胞复苏，复苏后重悬至含10%胎牛血清的RPIM1640培养基中，并在37℃、5%CO2、饱和湿度的条件下进行培养。在显微镜下观察A549细胞形态，并与 说明书中的形态进行对比；当A549细胞融合度为95%时进行细胞传代，并取二代细胞进行试验。1.2.2细胞转染取对数生长期A549细胞铺6孔板，待A549细胞融合度达70%～80%时应用lipo⁃fectamine2000分别转染lncRNA LIMT过表达质粒pEGFP-C1-LIMT及其空质粒pEGFP-C1-NC、敲减质粒siRNA-LIMT及其空质粒siRNA-NC，并相应作为pEGFP-C1-LIMT组、pEGFP-C1-NC组、siRNA-LIMT 组、siRNA-NC组。所有操作按照说明书进行，转染后将6孔板放入培养箱中细胞培养，培养条件为37℃、5%CO2浓度、饱和湿度。48h后可收集细胞，应用荧光显微镜检测细胞荧光验证其转染效率，并取细胞进行后续研究。
1.2.3细胞增殖能力检测用胰酶消化细胞，并应用PBS进行细胞重悬，收集各组细胞，调整细胞密度为2×104个/mL，96孔板铺入各组细胞，100µL/孔，每组设3个复孔，将96孔板放入培养箱中培养，培养条件为37℃、5%CO2浓度、饱和湿度。分别于细胞转染后24、48、72h向每个孔加入CCK-8细胞增殖检测试剂10µL/孔，并用酶标仪检测450nm处吸光值（OD450值）。
1.2.4细胞凋亡检测用胰酶消化细胞，并应用PBS重悬细胞。收集各组细胞，细胞计数后加入PBS 调整细胞密度至1×106个/mL，加入100µL1×binding buffer，轻轻混匀后将各组细胞分别加入到1.5mL的EP管中。避光条件下加入AnnexinV-FITC5µL和PI staining solution5µL进行染，轻轻混匀，室温下反应15min。加入400µL1×binding buffer，1h内应用流式细胞仪进行检测，检测结果以散点图呈现，其中右上象限为晚期凋亡细胞，右下象限为早期凋亡细胞。1.2.5lncRNA LIMT表达检测采用RT-qPCR
法。取各组转染的A549细胞，经研磨后加入Trlzol裂解液提取总RNA分子，应用逆转录试剂盒进行发转录生成cDNA，并进行基因扩增。lncRNA LIMT上游引物为5'-TTACCCACCCTACTTTCCC-3'，下游引物为5'-TTGTGCCCATCTACCAGG-3'，内参为β-actin，上游引物为5'-CACTGTCCCATCACGAGG-3'，下游引物为5'-TAATGTCACGCACGATTTCC-3'，反应条件为：50℃、2min，95℃、10min，95℃、15s，60℃、15s，共40个循环，并应用2-ΔΔCt进行定量分析。
1.2.6EGFR、p-EGFR、ERK、p-ERK蛋白表达检测采用Western boltting法。取各组转染的A549细胞，加入蛋白裂解液RIPA混匀后充分裂解，3000r/min 离心10min，离心半径6cm。取上清后进行蛋白定量，然后进行电泳、转模、封闭等，加入EGFR蛋白一抗、p-EGFR蛋白一抗、ERK蛋白一抗、p-ERK蛋白一抗孵育过夜，TBST冲洗，避光加入生物学二抗孵育1h，以GAPDH为内参应用Image Lab软件测量蛋白相对表达量。
1.3统计学方法应用SPSS2
2.0统计学软件进行
43
分析；计量资料符合正态分布以xˉ±s表示，多组比较采用方差分析，两两比较应用LSD-t检验。P<
0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1各组细胞增殖能力CCK8增殖试验显示，四
组细胞增殖能力比较有统计学差异（P<0.05）；pEG⁃FP-C1-LIMT组A549细胞24、48、72h增殖能力均低于pEGFP-C1-NC组（P均<0.05），siRNA-LIMT组A549细胞24、48、72h增殖能力均高于siRNA-NC组（P均<0.05）。见表1。
2.2各组细胞凋亡情况流式细胞仪检测显示，四组细胞凋亡情况比较有统计学差异（P<0.05）；A549细胞凋亡pEGFP-C1-LIMT组［（74.46±4.28）%］高于pEGFP-C1-NC组［（52.33±5.23）%］（P<0.05），siRNA-LIMT组［（41.36±4.23）%］低于siRNA-NC 组［（52.54±4.88）%］（P<0.05）。
2.3各组细胞lncRNA LIMT表达RT-qPCR检测结果显示，四组细胞lncRNA LIMT水平比较有统计学差异（P<0.05）；lncRNA LIMT水平pEGFP-C1-LIMT组（12.78±1.82）高于pEGFP-C1-NC组（0.94±0.12）（P<0.05），siRNA-LIMT组（0.07±0.01）低于siRNA-NC组（0.81±0.16）（P< 0.05）。
2.4各组细胞EGFR、p-EGFR、ERK、p-ERK蛋白表达Western boltting检测显示，pEGFP-C1-LIMT 组A549细胞中EGFR、p-ERK蛋白低于pEGFP-C1-NC组，p-EGFR、ERK蛋白高于pEGFP-C1-NC组（P 均<0.05）；siRNA-LIMT组A549细胞中EGFR、p-ERK蛋白高于siRNA-NC组，p-EGFR、ERK蛋白低于siRNA-NC组（P均<0.05）。见表2。
3讨论
肺癌是起源于支气管黏膜和（或）支气管腺体的恶性肿瘤。根据《全球疾病死亡率及负担》研究报告显示，全球每年因肺癌死亡人数超过170万例，其中我国为55万例，约占全球肺癌死亡人数的33%，占我国肿瘤死亡人数的25%［7］。大量研究显示，大气污染、吸烟、电离辐射以及反复发生的肺部感染、等均与肺癌的发生有密切关系［8-10］。临床上对于非小细胞肺癌仍主张早期进行手术切除，但由于肺癌发病隐匿，大多数患者就诊时已处于晚期，丧失了手术的机会。临床数据显示，对于Ⅰ期患者接受手术后5年生存率56%～73%，而晚期肺癌患者5年生存率不足15%［11］，其中肺癌侵袭和转移是导致患者死亡的重要因素。肿瘤侵袭和转移过程是一个涉及多种基因异常表达的多因素、多步骤的复杂过程，研究肺癌发生、发展、侵袭和转移的分子机制有助于肺癌的早期诊断、制定新的方案、明确预后等。
过去很长一段时间内，RNA在人体基因表达中作用一直被忽视；直至人类基因组计划的完成，人们发
现人类基因组中超过90%的基因为RNA分子，其中仅2%的RNA能够翻译为蛋白质，其余RNA分子不编码蛋白质，被称为非编码RNA［12］。非编码RNA 包括转录RNA、核仁小RNA、微小RNA及lncRNAs 等。起初人们认为lncRNAs是一类没有生物学功能的RNA分子。近年来研究证实，lncRNAs可以调控基因核内转运、干扰基因转录、参与染质修饰等起到调控基因表达的作用，并参与了机体遗传、发育、细胞分化、细胞周期调控等众多生命活动［13-14］。ln⁃
cRNA LIMT是近年来新发现的一种lncRNA分子，又称为LINC01089，是一种与肿瘤的发生、发展有密切相关的lncRNA分子［15］。已有研究表明，lncRNA LIMT可以抑制乳腺癌、肺癌的发生和发展。ZHAO 等［16］报道，与正常乳腺细胞比较，乳腺癌MCF细胞
表1四组细胞不同时间点增殖能力比较（xˉ±s）
组别pEGFP-C1-LIMT组pEGFP-C1-NC组siRNA-LIMT组siRNA-NC组n
3
3
3
3
细胞OD450值
0h
0.36±0.07
0.35±0.05
0.37±0.06
0.36±0.04
24h
0.58±0.07
0.39±0.06
0.60±0.08
0.44±0.05
48h
0.68±0.08
0.42±0.05
1.13±0.09
0.58±0.05
72h
1.38±0.11
0.62±0.08
2.13±0.15
1.22±0.07表2四组细胞EGFR、p-EGFR、ERK、p-ERK蛋白表达比较（xˉ±s）
组别pEGFP-C1-LIMT组pEGFP-C1-NC组siRNA-LIMT组siRNA-NC组n
3
3
3
3
EGFR
1.35±0.15
3.28±0.21
4.23±0.32
3.07±0.23
p-EGFR
3.56±0.26
1.67±0.11
0.58±0.08
1.78±0.18
ERK
3.05±0.22
2.08±0.15
1.14±0.11
2.35±0.23
p-ERK
0.57±0.08
1.62±0.13
3.46±0.25
1.38±0.15
44
中lncRNA LIMT表达下调，通过表皮生长因子刺激MCF细胞可以导致lncRNA LIMT进一步下调，并认为lncRNA LIMT可以通过抑制表皮生长因子起到抑制乳腺癌发生、发展的作用。王春刚等［17］研究发现，lncRNA LIMT可以通过调控转化生长因子β信号通路，抑制肺癌细胞恶性转变。但目前关于肺癌组织中lncRNA LIMT表达情况及其对肺癌细胞增殖、凋亡影响仍缺乏相关报道。
为了研究lncRNA LIMT在肺癌中是否具有生物学功能，我们应用CCK8试验观察不同组别A549细胞的增殖能力，应用流式细胞仪观察不同组别A549细胞的凋亡能力。结果显示pEGFP-C1-LIMT组A549细胞增殖能力降低，凋亡比例升高，而siRNA-LIMT组A549细胞增殖能力升高，凋亡比例降低。表明lncRNA LIMT具有抑制肺癌A549细胞增殖、促进其凋亡的作用。当lncRNA LIMT降低时可以引起肺上皮细胞、腺细胞增殖不受控制、凋亡受到抑制，并促进细胞恶变。本结果也提示通过对lncRNA LIMT进行调控可能是肺癌精准的新策略。
目前已有研究表明，EGFR信号通路在调节细胞和组织稳定中发挥重要作用［18］。EGFR是上皮细
胞增殖和信号传导的重要受体，与肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭、血管生成及转移有密切关系。正常情况下EGFR处于非磷酸化状态，当EGFR发生磷酸化时可以导致其功能降低［19-20］。EGFR突变也是肺癌发生的重要原因。研究表明，10%～44%的肺癌中存在EGFR突变［21］。ERK是MAPK信号通路中的重要分子，具有调节细胞增殖、分化、维持组织正常形态的功能［22］。研究表明，当ERK被磷酸化后可以激活MAPK信号通路，并导致细胞进入G1期，细胞增殖速度加快，引起细胞恶变［23］。本研究结果显示，pEGFP-C1-LIMT组A549细胞中EGFR、p-ERK蛋白呈低表达，p-EGFR、ERK蛋白呈高表达；与此相反，siRNA-LIMT组A549细胞中EGFR、p-ERK蛋白呈高表达，p-EGFR、ERK蛋白显呈低表达，表明ln⁃cRNA LIMT可以促进EGFR磷酸化，进而导致EGFR 功能降低，抑制肺癌细胞的增殖。而lncRNA LIMT 还可以通过抑制ERK磷酸化，从而抑制MAPK信号通路，并组织细胞进入G1期，起到抑制肺癌细胞的增殖，促进其凋亡的作用。
综上所述，lncRNA LIMT在肺癌组织中低表达，lncRNA LIMT可以抑制肺癌细胞的增殖，促进肺癌细胞凋亡，其机制可能与lncRNA LIMT调控EGFG-ERK信号有关。参考文献：
［1］FIDLER M M，SOERJOMATARAM I，BRAY F.A global view on cancer incidence and national levels of the human development
index［J］.Int J Cancer，2016，139（11）：2436-2446.
［2］于丽娅，穆慧娟，礼彦侠，等.辽宁省城市社区2000年肺癌患者分期和方式与5年生存率关联分析［J］.中华肿瘤防治
杂志，2018，25（21）：1477-1482.
［3］KOPP F，MENDELL J T.Functional classification and experi⁃mental dissection of long noncoding RNAs［J］.Cell，2018，172
（3）：393-407.
［4］LABONNE J D，LEE K H，IWASE S，et al.An atypical 12q24.31microdeletion implicates six genes including a histone
demethylase KDM2B and a histone methyltransferase SETD1B in
syndromic intellectual disability［J］.Hum Genet，2016，135（7）：757-771.
等离子体发生器
［5］YUAN H，QIN Y，ZENG B，et al.Long noncoding RNA LINC01089predicts clinical prognosis and inhibits cell prolifera⁃
tion and invasion through the Wnt/β-catenin signaling pathway in
breast cancer［J］.Onco Targets Ther，2019，12：4883-4895.［6］YANG F，CHEN X，LI X，et al.Long intergenic non-protein coding RNA1089suppresses cell proliferation and metastasis in
gastric cancer by regulating miRNA-27a-3p/epithelial-mesenchy⁃
mal transition（EMT）axis［J］.Cancer Manag Res，2020，12：5587-5596.
生姜切片机
［7］ZHOU M，WANG H，ZENG X，et al.Mortality，morbidity，and risk factors in China and its provinces，1990-2017：a systematic
analysis for the Global Burden of Disease Study2017［J］.Lancet，2019，394（10204）：1145-1158.
［8］张美娟.非小细胞肺癌患者发病危险因素的logistic回归分析［J］.中国卫生统计，2020，37（3）：462-464.
［9］刘静，刘洪梅，李天一，等.唐山市城区女性肺癌发病的危险因素及预防对策［J］.现代肿瘤医学，2019，27（23）：4293-4296.［10］房广梅，徐军，朱兰萍，等.扬州市肺癌发病风险因素的Logis⁃tic回归分析［J］.数学的实践与认识，2016，46（6）：114-119.［11］METS O M，SCHAEFER-PROKOP C M，DE JONG P A.Prima⁃ry lung cancer in patients with previous malignan
cies：a nation⁃
wide study［J］.Thorax，2019，74（5）：492-495.
［12］SUN Q，HAO Q.Nuclear long noncoding rnas：key regulators of gene expression［J］.Trends Genet，2018，34（2）：142-157.［13］QIAN X，ZHAO J，YEUNG P Y，et al.Revealing lncRNA struc⁃tures and interactions by sequencing-based approaches［J］.
Trends Biochem Sci，2019，44（1）：33-52.
［14］LEI Y，SHI Y，DUAN J，et al.Identification of alternative splic⁃ing and lncRNA genes in pathogenesis of small cell lung cancer
based on their RNA sequencing［J］.Adv Clin Exp，2019，28（8）：1043-1050.
［15］KANG M，SHI J，LI B，et al.LncRNA DGCR5regulates the non-small cell lung cancer cell growth，migration，and invasion
through regulating miR-211-5p/EPHB6axis［J］.Biofactors，2019，45（5）：788-794.
［16］ZHAO Y，MA J，FAN Y，et al.TGF-βtransactivates EGFR and facilitates breast cancer migration and invasion through canonical
（下转第48页）
45
SOFA评分是通过测定主要器官功能损害程度对患者进行预后判断的评分系统，常用于ICU病房，并且在脓毒症的诊断和评估预后中具有重要意义。本研究结果显示，脓毒症AKI患者的SOFA评分明显高于非AKI患者。ROC曲线分析显示SOFA预测脓毒症AKI的AUC为0.68，最佳截断值为9.5mmHg。
综上所述，脓毒症患者第1个24h的DAP、CVP、IAP、SOFA评分与患者AKI的发生密切相关，维持适当的血流动力学参数、降低腹内压及SOFA 评分可能有助于减少脓毒症相关AKI的发生。
参考文献：
［1］YEGENAGA I，TUGLULAR S，ARI E，et al.Evaluation of sep⁃sis/systemic inflammatory response syndrome，acute kidney inju⁃
ry，and RIFLE criteria in two tertiary hospital intensive care units
in Turkey［J］.Nephron Clin Pract，2010，115（4）：276-282.［2］PLATAKI M，KASHANI K，CABELLO-GARZA J，et al.Predic⁃tors of acute kidney injury in septic shock patients：an observa⁃
tional cohort study［J］.Clin J Am Soc Nephrol，2011，6（7）：1744-1751.
［3］ASFAR P，MEZIANI F，HAMEL JF，et al.High versus low blood-pressure target in patients with septic shock［J］.N Engl J
Med，2014，370（17）：1583-1593.
［4］POUKKANEN M，WILKMAN E，VAARA S T，et al.Hemody⁃namic variables and progression of acute kidney injury in critical⁃
ly ill patients with severe sepsis：data from the prospective obser⁃
恶劣的太阳
vational FINNAKI study［J］.Crit Care，2013，17（6）：295-305.［5］BADIN J，BOULAIN T，EHRMANN S，et al.Relation between mean arterial pressure and renal function in the early phase of
shock：a prospective，explorative cohort study［J］.Crit Care，2011，15（3）：135-146.
［6］WONG B T，CHAN M J，GLASSFORD N J，et al.Mean arterial pressure and mean perfusion pressure deficit in septic acute kid⁃
ney injury［J］.J Crit Care，2015，30（5）：975-981.
［7］LEGRAND M，DUPUIS C，SIMON C，et al.Association be⁃tween systemic hemodynamics and septic acute kidney injury in
critically ill patients：a retrospective observational study［J］.Crit
Care，2013，17（6）：278-292.
［8］ANTAL O，STEFANESCU E，MLENI E M，et al.Hemodynamic predictors for sepsis-induced acute kidney injury：A preliminary
study［J］.J Clin Med，2020，9（1）：151-161.
［9］DUBIN A，POZO M O，CASABELLA C A，et al.Increasing ar⁃terial blood pressure with norepinephrine does not improve micro⁃
circulatory blood flow：a prospective study［J］.Crit Care，2009，13（3）：92-99.
［10］MULLENS W，ABRAHAMS Z，FRANCIS G S，et al.Impor⁃tance of venous congestion for worsening of renal function in ad⁃
vanced decompensated heart failure［J］.J Am Coll Cardiol，2009，53（7）：589-596.
［11］MATĚJKA J，VARVAŘOVSKÝI，ROZSÍVAL V，et al.Heart failure is the strongest predictor of acute kidney injury in patients
undergoing primary percutaneous coronary intervention for ST-ele⁃
vation myocardial infarction［J］.Kardiol Pol，2016，74（1）：18-24.
［12］RILEY A，GEBHARD D J，AKCAN-ARIKAN A.Acute Kidney injury in pediatric heart failure［J］.Curr Cardiol Rev，2016，12
（2）：121-131.
［13］GUGLIN M，RIVERO A，MATAR F，et al.Renal dysfunction in heart failure is due to congestion but not low output［J］.Clin Car⁃
diol，2011，34（2）：113-116.
［14］LINGEGOWDA V，EJAZ A A，SOOD P.Normotensive ischemic acute kidney injury as a manifestation of intra-abdominal hyper⁃
tension［J］.Int Urol Nephrol，2009，41（4）：1043-1045.
［15］DEMARCHI A C，DE ALMEIDA C T，PONCE D，et al.Intra-abdominal pressure as a predictor of acute kidney injury in postop⁃
erative abdominal surgery［J］.Ren Fail，2014，36（4）：557-561.［16］陈秀凯，李文雄.腹内高压并发急性肾损伤：压力重于容量［J］.中华医学杂志，2012，92（15）：1009-1011.
（收稿日期：2021-03-01）
Smad3and ERK/Sp1signaling pathways［J］.Mol Oncol，2018，12（3）：305-321.
［17］王春刚，陈山，王志峰，等.长链非编码RNA LIMT调控TGF-β信号通路对肺癌细胞增殖与凋亡的影响［J］.现代肿瘤医学，2020，28（18）：3108-3113.
［18］LIU X，WANG P，ZHANG C，et al.Epidermal growth factor re⁃ceptor（EGFR）：A rising star in the era of precision medicine of
lung cancer［J］.Oncotarget，2017，8（30）：50209-50220.
［19］TSAI C J，NUSSINOV R.Emerging allosteric mechanism of egfr activation in physiological and pathological contexts［J］.Biophys
J，2019，117（1）：5-13.
［20］LEONETTI A，SHARMA S，MINARI R，et al.Resistance mech⁃anisms to osimertinib in EGFR-mutated non-small cell lung cancer
［J］.Br J Cancer，2019，121（9）：725-737.汽车除霜器
［21］CARLISLE J W，RAMALINGAM S S.Role of osimertinib in the treatment of EGFR-mutation positive non-small-cell lung cancer ［J］.Future Oncol，2019，15（8）：805-816.
［22］SOORO M A，ZHANG N，ZHANG P.Targeting EGFR-mediated autophagy as a potential strategy for cancer therapy［J］.Int J Can⁃
cer，2018，143（9）：2116-2125.
［23］THOMAS R，SRIVASTAVA S，KATREDDY R R，et al.Kinase-inactivated EGFR is required for the survival of wild-type EGFR-
expressing cancer cells treated with tyrosine kinase inhibitors［J］.
Int J Mol Sci，2019，20（10）：2515.
（收稿日期：2020-11-16）
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