doi:10.3969/j.issn.1000⁃484X.2021.05.010
㊃肿瘤免疫学㊃
张建育 李毅宁 郭一泓 穆 鑫 (福建医科大学附属第二医院泌尿外科，泉州362000)
中图分类号 R737.25 文献标志码 A 文章编号 1000⁃484X (2021)05⁃0564⁃07
①本文为福建省自然科学基金项目(No.2018J01282)㊂
作者简介：张建育，男，硕士，副主任医师，主要从事泌尿外科疾病方面的研究,E⁃mail:㊂
[摘 要] 目的：探讨长链非编码RNA(LncRNA LINC00355)对前列腺癌细胞增殖㊁侵袭㊁迁移的影响及其作用机制㊂方法:qRT⁃PCR 检测前列腺癌组织及癌旁组织中LINC00355㊁miR⁃494⁃3p㊁细胞周期蛋白HD2(CCND2)mRNA 的表达水平；体外培养前列腺癌细胞DU145，分别将si⁃NC㊁si⁃LINC00355㊁si⁃LINC00355与anti⁃miR⁃NC㊁si⁃LINC00355与anti⁃miR⁃494⁃3p㊁si⁃LINC00355与miR⁃NC㊁si⁃LINC00355与miR⁃494⁃3p mimics 共转染至DU145细胞㊂MTT 检测细胞增殖;Transwell 小室实验检测 细胞迁移及侵袭能力；双荧光素酶报告实验验证LINC00355与miR⁃494⁃3p 的靶向调控作用以及miR⁃494⁃3p 与CCND2的靶向调控作用;Western blot 检测CCND2㊁P21㊁上皮钙黏附素(E⁃cadherin)㊁基质金属蛋白酶⁃2(MMP⁃2)蛋白表达量㊂结果：与癌旁组织相比，前列腺癌组织中LINC00355与CCND2mRNA 的表达水平显著升高(P <0.05),miR⁃494⁃3p 的表达水平显著降低(P <0.05)；与si⁃NC 组㊁si⁃LINC00355+miR⁃NC 组相比,si⁃LINC00355组㊁si⁃LINC00355+miR⁃494⁃3p 组细胞增殖抑制率显著升高(P <0.05)，迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P <0.05),P21㊁E⁃cadherin 蛋白水平显著升高(P <0.05),MMP⁃2蛋白水平显著降低(P <0.05)；与si⁃NC 组相比,si⁃LINC00355组细胞中miR⁃494⁃3p 的表达水平显著升高(P <0.05),CCND2mRNA 及蛋白表达水平均显著降低(P <0.05)；与si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC 组相比,si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃3p 组细胞增殖抑制率显著降低(P <0.05)，迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多(P <0.05),P21㊁E⁃cadherin 蛋白水平显著降低(P <0.05),MMP⁃2蛋白水平显著升高(P <0.05)；双荧光素酶报告实验证实LINC00355能够靶向结合miR⁃494⁃3p,miR⁃494⁃3p 能够靶向CCND2㊂结论:LINC00355通过与CCND2竞争结合miR⁃494⁃3p，降低miR⁃494⁃3p 对CCND2表达的抑制作用，从而促进前列腺癌细胞增殖㊁侵袭㊁迁移㊂
[关键词] LncRNA LINC00355;miR⁃494⁃3p;CCND2；前列腺癌；增殖；侵袭；迁移
Effects of LINC00355on regulation of miR⁃494⁃3p /CCND2on proliferation ,invasion and migration of prostate cancer cells
ZHANG Jian⁃Yu ,LI Yi⁃Ning ,GUO Yi⁃Hong ,MU Xin .Department of Urology Surgery ,the Second Affiliated Hospital of Quanzhou Medical University ,Quanzhou 362000,China
[Abstract ] Objective :To investigate the effect of LncRNA LINC00355on the proliferation,invasion and migration of prostate
cancer cells and its mechanism of action.Methods :qRT⁃PCR was used to detect the expression levels of LINC00355,miR⁃494⁃3p and CCND2mRNA in prostate cancer tissues and adjacent tissues.Prostate cancer cell DU145was cultured in vitro.si⁃NC,si⁃LINC00355,本草茶
si⁃LINC00355and anti⁃miR⁃NC,si⁃LINC00355and anti⁃miR⁃494⁃3p,si⁃LINC00355and miR⁃NC,si⁃LINC00355co⁃transfected with miR⁃494⁃3p mimics into DU145cells.MTT is used to detect cell proliferation.Transwell chamber experiments were performed to detect cell migration and invasion.The double luciferase report experiment verified the targeted regulation of LINC00355and miR⁃494⁃3p,and the targeted regulation of miR⁃494⁃3p and CCND2.Western blot was used to detect the expression of CCND2,P21,E⁃cadherin and
MMP⁃2proteins.Results :Compared with adjacent cancer tissues,the expression levels of LINC00355and CCND2mRNA in prostate cancer tissues were significantly increased(P <0.05),and t
he expression levels of miR⁃494⁃3p were significantly decreased(P <0.05).
Compared with the si⁃NC group and si⁃LINC00355+miR⁃NC group,the si⁃LINC00355group,si⁃LINC00355+miR⁃494⁃3p group had significantly higher cell proliferation inhibition rates(P <0.05),the number of migrating cells and the number of invasion cells were sig⁃
nificantly reduced(P <0.05),the levels of P21and E⁃cadherin proteins were significantly increased(P <0.05),and the levels of MMP⁃
2protein were significantly reduced(P<0.05).Compared with the si⁃NC group,the expression level of miR⁃494⁃3p in the si⁃LINC00355group was significantly increased(P<0.05),and the levels of CCND2mRNA and protein were significantly reduced(P< 0.05).Compared with the si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC group,the cell proliferation inhibition rate in the si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃3p group was significantly reduced(P<0.05),and the number of migrating cells and invading cells were significantly increased(P< 0.05),the levels of P21,E⁃cadherin protein were significantly reduced(P<0.05),and the levels of MMP⁃2protein were significantly increased(P<0.05).Double luciferase reporting experiments confirmed that LINC00355was able to target miR⁃494⁃3p,miR⁃494⁃3p was able to target CCND2.Conclusion:LINC00355competes with CC
ND2and binds miR⁃494⁃3p to reduce the inhibitory effect of miR⁃494⁃3p on CCND2expression,thereby promoting the proliferation,invasion and migration of prostate cancer cells.
[Key words] LncRNA LINC00355;miR⁃494⁃3p;CCND2;Prostate cancer;Proliferation;Invasion;Migration
前列腺癌是临床常见恶性肿瘤之一，其发病率逐年升高，但前列腺癌发生及转移的分子机制尚未阐明[1]㊂长链非编码RNA(long non⁃coding RNA, LncRNA)在多种肿瘤中异常表达并可影响肿瘤细胞增殖㊁分化等过程[2]㊂研究表明LncRNA表达异常与前列腺癌发生及发展密切相关[3]㊂但关于其具体作用机制尚未阐明㊂长链非编码RNA (LncRNA LINC00355)在肿瘤中呈高表达并可促进肿瘤进展[4]㊂微小RNA⁃494⁃3p(microRNA⁃494⁃3p, miR⁃494⁃3p)在髓母细胞瘤中呈低表达，上调其表达可抑制肿瘤进展[5]㊂细胞周期蛋白HD2(cyclin⁃D2,CCND2)在卵巢癌中表达量升高，下调其表达可抑制肿瘤细胞迁移及侵袭[6]㊂生物学信息学分析显示LINC00355与miR⁃494⁃3p存在结合位点,miR⁃494⁃3p与CCND2存在结合位点，但LINC00355是否可通过调控miR⁃494⁃3p/CCND2参与前列腺癌发生及发展过程尚未可知㊂本研究主要探讨前列腺癌组织中LINC00355㊁miR⁃494⁃3p㊁CCND2的表达，探究LINC00355对前列腺癌细胞增殖㊁侵袭㊁迁移的影响，分析其对miR⁃494⁃3p㊁CCND2的调控作用，旨在为揭示前列腺癌发生及转移的分子机制奠定理论基础㊂
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验试剂 前列腺癌细胞DU145购自美国ATCC细胞库；杜氏改良培养基(DMEM)㊁胎牛血清㊁胰蛋白酶购自美国Gibco公司;Lipofecta⁃mine2000与TRIzol试剂购自美国Invitrogen公司；反转录与qRT⁃PCR试剂盒购自美国Thermo Fisher 公司;LINC00355小干扰RNA(si⁃LINC00355)(序列:ACGAUCUAUCGAUCGUAG)㊁乱序无意义阴性对照(si⁃NC)㊁miR⁃494⁃3p特异性寡核苷酸抑制剂(anti⁃miR⁃494⁃3p)(序列:GUUUGUUUUCACUAGU⁃CUAGC)及其阴性对照(anti⁃miR⁃NC)㊁miR⁃494⁃3p 寡核苷酸模拟物(miR⁃494⁃3p mimics)(序列:AGUCGAUCUACGUAGCUAGUCG)及阴性对照mimic NC序列(miR⁃NC)购自广州锐博生物科技有限公司;pcDNA3.1购自上海远慕生物科技有限公司；甲基噻唑基四唑(methylthiazolyl tetrazolium, MTT)㊁二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)㊁膜联蛋白V(Annexin V)⁃异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)细胞凋亡试剂盒购自美国Sigma公司;Transwell小室购自美国Corning公司;Matrigel基质胶购自美国BD公司；兔抗人P21㊁上皮钙黏附素(E⁃cadherin)㊁基质金属蛋白酶⁃2 (matrix metalloproteinases⁃2,MMP⁃2)抗体购自美国CST公司；兔抗人CCND2抗体与辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔二抗购自武汉艾美捷科技有限公司㊂
1.1.2 前列腺癌组织及癌旁组织标本来源 收集2017年2月至2018年12月本院收治的36例前列腺癌患
地磁指数预报者为研究对象，所有患者均经病理证实为前列腺癌，年龄50~65岁，平均年龄(55.49±6.57)岁，术中切除前列腺癌组织及癌旁组织，置于-80℃超低温冰箱保存㊂本研究经本院伦理委员会批准，所有患者知情且签署同意书㊂
1.2 方法
1.2.1 细胞转染及分组 前列腺癌细胞DU145培养于含有10%胎牛血清的DMEM培养基，置于37℃㊁5%CO2培养箱中培养，取对数期DU145细胞,0.25%胰蛋白酶消化，制备细胞悬液，调整细胞密度为1×105个/ml，接种于24孔板(100μl/孔)，待细胞生长融合至70%时参照Lipofectamine2000说明书进行转染，分别将si⁃NC㊁si⁃LINC00355㊁si⁃LINC00355与anti⁃miR⁃NC㊁si⁃LINC00355与anti⁃miR⁃494⁃3p㊁si⁃LINC00355与miR⁃NC㊁si⁃LINC00355与miR⁃494⁃3p mimics共转染至DU145细胞，分别记作si⁃NC组㊁si⁃LINC00355组㊁si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC组㊁si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃3p组㊁si⁃LINC00355+miR⁃NC组㊁si⁃LINC00355+miR⁃494⁃3p 组㊂转染前2h更换为不含血清的培养基，转染6h
后更换为含有10%胎牛血清的DMEM完全培养基，继续培养48h收集细胞㊂
1.2.2 qRT⁃PCR检测LINC00355㊁miR⁃494⁃3p㊁CCND2mRNA的表达水平 采用TRIzol法提取前列腺癌组织㊁癌旁组织及各组DU145细胞中的总RNA,Nanodrop2000c超微量分光光度计检测RNA 浓度
㊂参照反转录试剂盒将总RNA合成cDNA㊂LINC00355F:5′⁃GTCTTGCTTTGTCACCCAGG⁃3′,R: 5′⁃CTAACACTTTGGGCAGCGTT⁃3′;miR⁃494⁃3p F: 5′⁃CTTCGGCAGCACATATACTAAA⁃3′,R:5′⁃TCGAC⁃TAGTCCAGCATGTCA⁃3′;CCND2F:5′⁃ACTTGTGAT⁃GCCCTGACTGA⁃3′,R:5′⁃AAGTTGGGCACAGGTCG⁃ATA⁃3′;U6F:5′⁃GCTTCGGCAGCACATATACT⁃3′, R:5′⁃GTGCAGGGTCCGAGGTATTC⁃3′;GAPDH F:5′⁃AACGGATTTGGTCGTATTG⁃3′,R:5′⁃GGAAGATG⁃GTGATGGGATT⁃3′，引物由上海生工生物工程股份有限公司设计合成㊂按照RT⁃PCR试剂盒配置反应体系，置于ABI7500型荧光定量PCR仪中检测，反应条件:95℃2min,95℃30s,60℃30s,72℃30s，共40次循环㊂LINC00355与CCND2以GAPDH为内参,miR⁃494⁃3p以U6为内参，采用2-ΔΔCt法计算LINC00355㊁miR⁃494⁃3p㊁CCND2mRNA相对表达㊂1.2.3 MTT检测细胞增殖 收集各组对数期DU145细胞接种于96孔板(5×104个/孔)，每组设置3个复孔，转染48h时，每孔加入质量浓度为5mg/ml的MTT溶液20μl,37℃培养箱继续培养4h,1300r/min离心5min，弃上清，加入150μl DMSO，室温振荡孵育5min，酶标仪检测各孔吸光度值(490nm)，计算细胞增殖抑制率(%)，细胞增殖抑制率=(1-实验组OD值/空白对照组OD值)×100%㊂1.2.4 Transwell实验检测细胞迁移与侵袭 细胞迁移实验：收集各组对数期DU145细胞接种于24孔板Transwell小室的上室(5×104个/孔),Transwell 小室的下室加入含有10%胎牛血清的培养液(600μl/孔),37℃培养箱内培养24h，弃上清液, PBS洗涤，多聚甲醛固定20min,PBS洗涤，加入0.1%结晶紫染液染10min，棉签擦拭未迁移的细胞，显微镜下观察迁移细胞数㊂细胞侵袭实验：预冷培养液按照9∶1的比例稀释Matrigel基质胶，加入24孔板Transwell小室的上室(40μl/孔),37℃培养箱内孵育5h，后续实验步骤同细胞迁移实验，显微镜下观察侵袭细胞数㊂
1.2.5 双荧光素酶报告基因检测LINC00355靶向miR⁃494⁃3p及miR⁃494⁃3p靶向CCND2 starBase 预测显示LINC00355与miR⁃494⁃3p存在结合位点,CCND2的3′UTR含有miR⁃494⁃3p的互补序列，采用基因定点突变技术突变结合位点，分别将含有结合位点与突变位点的片段克隆至pmirGLO载体得到野生型载体WT⁃LINC00355㊁突变型载体MUT⁃LINC00355㊁野生型载体WT⁃CCND2㊁突变型载体MUT⁃CCND2，分别将WT⁃LINC00355㊁MUT⁃LINC00355㊁WT⁃CCND2㊁MUT⁃CCND2与miR⁃NC㊁miR⁃494⁃3p mimics共转染至DU145细胞㊂转染24h后收集细胞，检测细胞相对荧光素酶活性㊂1.2.6 Western blot检测CCND2㊁P21㊁E⁃cadherin㊁MMP⁃2蛋白表达 收集各组对数期DU145细胞，采用蛋白提取试剂盒提取细胞总蛋白并检测蛋白浓度㊂采用SDS⁃PAGE分离蛋白，分离的蛋白凝胶转移至PVDF膜,5%脱脂牛奶封闭2h，加入蛋白一抗(1∶1000),4℃孵育24h,TBST洗涤，加入二抗(1∶5000)，室温孵育1h,TBST洗涤，加入ECL，暗室内曝光显影，应用ImageJ软件分析各条带灰度值㊂1.3 统计学处理 采用SPSS21.0统计学软件分析数据，计量资料以x±s表示且均符合正态分布，两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05为差异具有统计学意义㊂
2 结果
2.1 LINC00355㊁miR⁃494⁃3p㊁CCND2在前列腺癌组织和癌旁组织中的表达 与癌旁组织相比，前列腺癌组织中LINC00355与CCND2mRNA的表达水平显著升高(P<0.05),miR⁃494⁃3p的表达水平显著降低(P<0.05)，见表1㊂
2.2 抑制LINC00355对DU145细胞增殖㊁迁移㊁侵袭的影响 与si⁃NC组相比,si⁃LINC00355组LINC00355的表达水平显著降低(P<0.05)，细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05)，迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),P21㊁E⁃cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),MMP⁃2蛋白水平显著降低(P<0.05)，表1 LINC00355㊁miR⁃494⁃3p㊁CCND2在癌旁组织和前列腺癌组织中的表达(x±s,n=36)
Tab.1 Expression of LINC00355,miR⁃494⁃3p,CCND2in adj⁃acent tissues and prostate cancer tissue(x±s,n=36)
Groups LINC00355miR⁃494⁃3p CCND2mRNA Adjacent tissues1.00±0.060.98±0.041.01±0.06 Prostate cancer tissue2.37±0.081)0.28±0.031)2.14±0.071) t82.00084.00073.539
P<0.001<0.001<0.001 Note:Compared with adjacent tissues,1)P<0.001.
见图1㊁表2㊂2.3 抑制LINC00355对DU145细胞中miR⁃494⁃3p㊁CCND2表达的影响
与si⁃NC 组相比,si⁃
LINC00355组细胞中miR⁃494⁃3p 的表达水平显著升高(P <0.05),CCND2mRNA 及蛋白表达水平均显著降低(P <0.05)，见图2㊁表3㊂
2.4 抑制miR⁃494⁃3p 能减轻抑制LINC00355对DU145细胞增殖㊁迁移㊁侵袭的影响 与si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC 组相比,si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃3p 组miR⁃494⁃3p
的表达水平显著降图1 抑制LINC00355对DU145细胞中P21㊁E⁃cadherin ㊁
MMP⁃2蛋白表达的影响
Fig.1 Effect of inhibition of LINC00355on expressions of
P21,
E⁃cadherin
and
MMP⁃2
protein
in
DU145cells
Note:1.si⁃NC;2.
si⁃LINC00335.
图2 CCND2蛋白的表达
Fig.2 Protein expression of CCND2
Note:1.si⁃NC;2.si⁃LINC00335.
低(P <0.05)，细胞增殖抑制率显著降低(P <0.05)，迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多(P <0.05),P21㊁E⁃cadherin 蛋白水平显著降低(P <0.05),MMP⁃2蛋白水平显著升高(P <0.05)，见图3㊁表4㊂
2.5 miR⁃494⁃3p 过表达能增强抑制LINC00355对DU145细胞增殖㊁迁移㊁侵袭的影响 与si⁃
LINC00355+miR⁃NC 组相比,si⁃LINC00355+miR⁃
494⁃3p 组miR⁃494⁃3p 的表达水平显著升高(P <
表3
抑制LINC00355对细胞DU145中miR⁃494⁃3p ㊁
CCND2表达的影响(x ±s ,n =9)
Tab.3 Effect of inhibiting LINC00355on expression of
miR⁃494⁃3p and CCND2in DU145cells (x ±s ,n =9)
Groups miR⁃494⁃3p CCND2mRNA CCND2protein si⁃NC
0.98±0.071.00±0.050.87±0.06si⁃LINC00355
自行葫芦
1.71±0.091)0.31±0.031)0.42±0.041)t 19.20835.50018.721P <0.001
<0.001
<0.001
Note:Compared with si⁃NC group,1)P <0.
001.
图3 P21㊁E⁃cadherin ㊁MMP⁃2蛋白的表达
Fig.3 Expression of P21,E⁃cadherin ,MMP⁃2protein
Note:1.si⁃LINC00335+anti⁃miR⁃NC;2.si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃
3p.
表2 抑制LINC00355对DU145细胞增殖㊁迁移㊁侵袭的影响(x ±s ,n =9)
Tab.2 Effect of inhibition LINC00355on proliferation ,migration and invasion of DU145cells (x ±s ,n =9)
Groups LINC00355Inhibition rate(%)
Number of
migrating cells Number of
invasion cells P21E⁃cadherin MMP⁃2si⁃NC
1.02±0.060.11±0.01136.00±9.1486.00±7.420.19±0.020.24±0.030.77±0.05
si⁃LINC00355
0.35±0.041)52.26±3.031)
61.00±6.081)38.00±4.291)
0.65±0.041)0.76±0.041)0.29±0.031)t 27.87451.63320.49616.80130.85831.20024.696P <0.001镀镍铜带
<0.05
<0.001<0.001<0.001
<0.001
<0.001Note:Compared with si⁃NC group,1)P <0.05.
0.05)，细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05)，迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),P21㊁E⁃cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),MMP⁃2蛋白水平显著降低(P<0.05)，见图4㊁表5㊂
2.6 LINC00355靶向miR⁃494⁃3p及miR⁃494⁃3p靶向CCND2 starBase预测显示LINC00355与miR⁃494⁃3p存在结合位点,miR⁃494⁃3p与CCND2存在结合位点，见图5A㊁B㊂双荧光素酶报告实验结果显示，转染野生型载体WT⁃LINC00355的细胞实验中, miR⁃494⁃3p组荧光素酶活性显著低于miR⁃NC组(P<0.05)；转染突变型载体MUT⁃LINC00355的细胞实验中,miR⁃494⁃3p组荧光素酶活性与miR⁃NC 组相比差异无统计学意义(P>0.05)；转染野生型载体WT⁃CCND2的细胞实验中,miR⁃494⁃3p组荧光素酶活性显著低于miR⁃NC组(P<0.05)；转染突变型载体MUT⁃CCND2的细胞实验中,miR⁃494⁃3p组荧光素酶活性与miR⁃NC组相比差异无统计学意义(P>0.05)，见表6㊂与pcDNA
3.1组相比,pcDNA 3.1⁃LINC00355组细胞中miR⁃494⁃3p的表达水平显著降低(P<0.05)，见表7㊂与miR⁃NC组相比,miR⁃494⁃3p组细胞中CCND2mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)；与anti⁃miR⁃NC组相比,
anti⁃miR⁃494⁃3p组细胞中CCND2mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)，见图5C㊁表
8㊂
图4 P21㊁E⁃cadherin㊁MMP⁃2蛋白的表达
Fig.4 Expressions of P21,E⁃cadherin,MMP⁃2protein Note:1.si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC;2.si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃3p.
表4 抑制miR⁃494⁃3p能减轻抑制LINC00355对DU145细胞增殖㊁迁移㊁侵袭的影响(x±s,n=9)
Tab.4 Inhibition of miR⁃494⁃3p could reduce inhibitory effect of LINC00355on proliferation,migration and invasion of DU145cells(x±s,n=9)
Groups miR⁃494⁃3p CCND2Inhibition
rate(%)
Number of
汽车电子防盗锁migrating cells
Number of
invasion cells P21E⁃cadherin MMP⁃2
si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC0.98±0.050.44±0.0352.35±3.4263±6.2137±4.170.67±0.040.78±0.040.28±0.03 si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃494⁃3p0.26±0.031)0.78±0.051)18.04±2.011)120±7.881)71±5.671)0.25±0.031)0.30±0.031)0.60±0.041) t37.04417.49326.70317.04414.49225.20028.80019.200
P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001 Note:Compared with si⁃LINC00355+anti⁃miR⁃NC group,1)P<0.001.
表5 miR⁃494⁃3p能增强抑制LINC00355对细胞DU145增殖㊁迁移㊁侵袭的影响(x±s,n=9)
Tab.5 miR⁃494⁃3p could enhance inhibitory effect of LINC00355on proliferation,migration and invasion of cell DU145 (x±s,n=9)
90DYW1Groups miR⁃494⁃3p CCND2Inhibition
rate(%)
Number of
migrating cells
Number of
invasion cells P21E⁃cadherin MMP⁃2
si⁃LINC00355+miR⁃NC0.99±0.060.43±0.0351.98±3.6162±4.3739±3.610.66±0.040.77±0.050.30±0.03 si⁃LINC00355+miR⁃494⁃3p1.68±0.081)0.15±0.021)77.19±4.231)40±3.581)24±2.361)0.92±0.051)1.03±0.061)0.12±0.021) t20.70023.29713.60011.68310.43412.1829.98714.977
P<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001 Note:Compared with si⁃LINC00355+miR⁃NC group,1)P<0.001.
豫公网安备41160202000603
站长QQ:729038198
关于我们
投诉建议