AKTApurifier操作入门

AKTApurifier 层析系统操作入门
为使用户在较短时间内尽快了解AKTA系列层析系统的功能和基本操作,特编写此操作入门。若需进一步了解详细内容,可参阅相应的组件、系统和软件说明书。
系统组件及系统功能介绍
1   系统组件
(1) Pump
系统泵:(system pump)双泵(AB泵),缓冲液及大体积样品输送
(2) Valve
三通阀:(SV-903)两个。
分别位于两个系统泵前,用于缓冲液输送管道(A1/A2, B1/B2)切换
七通阀:(INV-907)两个。
1. 上样阀(sample valve),用于上样环切换 (load/inject) 和系统泵清洗时废液管 (waste) 切换;
2. 流向切换阀(flow direction valve),用于层析柱流向切换 (downflow/upflow)
八通阀:1. 出口阀(outlet valve),选择收集出口。
(3) 收集器 Fraction
分段收集。
(4) 其它组件
梯度混合器(mixer)、柱前过滤器(on line filter)、紫外检测仪(UV-900)pH 电导仪 (pH/C-900 内含温度计)等。
系统功能
系统功能由上述各组件相互配合,协同工作。
(1) 缓冲液pH及梯度配制
(a)梯度制备 (Gradient)
AB泵分别放置AB液,由AB泵的流速变化产生梯度。
(b)自动缓冲液pH及梯度制备 (BufferPrep)
根据所用缓冲液配方,分别将A1A2B1B2放入相应的溶液,由A泵及其三通阀调配缓冲pH,由B消息钩子泵及其三通阀调配梯度。
(2) 上样
上样阀上样:将样品经进样阀 3 号口注入储存在样品环(Sample loop)内,再由阀门切换将样品带入层析柱;
系统泵上样:由三通阀选择进样管道,由系统泵将样品泵入层析柱。
(4) 收集
收集器收集:设置收集体积(Frac size),可自动按条件收集。
出口阀收集:按需要选择不同出口管收集。
  开机程序
开启电脑;
2打开 AKTApurifier 电源;
3启动 UNICORN 软件,输入用户名( User name) 和密码(Password),默认用户(default) 密码为 default,待AKTA自检结束后,在system control窗口中显示系统准备就绪 Instruments are ready)
UUNICORN 软件简介
Unicorn软件启动后共有四个窗口,其主要功能分别如下:
Main1系统关闭(Quit Program)和退出、登陆(Log on/off)
2系统管理的设定,如用户名、密码、文件和使用权限等设定,系统日志等;
3文件管理,如文件拷贝、移动、删除及压缩拷贝到磁盘等;
4方法组编辑(MethodQueues),将几个方法组合在一起,依次运行
Method Editor: 1.方法编辑;
2.缓冲液配方设置(如配方修改或新增配方等)
System Control: 1. 系统控制,可以手动控制(Manual)或运行方法(Run Method)
2. 系统设置,包括固定篮球架Alarms/Special/Monitors/Curves
3. 运行监测,有四个窗口:Run data/Curves/Flow scheme/Logbook
Evaluation: 结果处理,如积分(intergrate)、移动(shift) 计算 (Subtract/Add/Multiply/Divide ) 平滑(Smooth)、截取(Cut Curve)、绘制(Creat Curve)、打印(Print)
在每个窗口中均有专家建议(Adviser)和帮助信息(Help)
系统控制 (System Contral)
手动操作 (Manual)
1.1 手动操作命令简介
(1) Pump 
Flow:            设定系统泵流速
Gradient:        梯度设定
BufferPrep_pH:  使用缓冲液配制功能时,设定pH
SampleFlow:      设定样品泵流速
PumpWashpurfier:  系统泵清洗
(2) Flowpath  流路
PumpAInlet:      A 泵入口三通阀切换
PumpBInlet:      B 泵入口三通阀切换
InjectionValve:  上样阀切换
OutletValve:    收集出口阀切换
InjectionMark:  插入记号
(3) Alarm & Mon  报警、检测
WaveLength:        选择监测波长(1-3个)
AutoZeroUV:      紫外吸收校零
AveragingTime:     计算紫外吸收平均值的间隔时间
SetCondScale 0%:  输入0%B时的电导
SetCondScale 100%: 输入100%B时的电导
Alarm:            设置压力、紫外、电导、pH等报警限
Watch:             监测参数设置,配合方法编辑中的watch功能
(4) Frac  收集:
Peak_Frac_Parameters: 计峰收集参数设定
FracCollect_900:      分布收集每管体积
Frac_Stop_900:        停止分别收集
FeedTube:            换管收集
Peak_Fraction:        计峰收集每管体积
Peak_FracStop:        停止计峰收集
OutletFraction:       出口阀每风分段收集每段体积等设置
ResetFracNumber:      将当前分布收集的管号计为第一管
(5) Others 其它监控摄像机外壳
Block:           调用程序块(只在方法运行时可用)
Next_breakpoint:  跳到下一程序块(只在方法运行时可用)
BufferPrepRecipe: 选择缓冲液配方
Set_Mark:         插入提示语
End_Timer:        设定结束运行时间
Record on/off:    手动运行时开始或结束数据记录
1.2 手动操作示例
(1) 梯度洗脱
设定流速、梯度、柱位、收集方法后即可运行。各命令无先后次序要求。
(2) 自动配制缓冲pH及梯度
必须最先设定缓冲液配方,然后设定其它参数如流速、pH、梯度等。
(3) 记录图谱
运行“Record on”命令,开始记录图谱,停止记录则运行“Record off”命令。
   
1.3 运行监测 (212资源Monitoring a run)
在系统运行过程中,系统控制窗口同步显示系统检测的数据及各部件当前状态,共有四个窗口,显示不同内容,可同时打开:
Rundata:    运行参数
Curves:      数据曲线
Flow scheme: 系统流路图
Logbook:    运行记录
2   方法运行( Run Method)
启动方式
方法一:从主菜单(main)窗口方法(method)栏中,双击所选方法。
方法二:从系统(system control)窗口中,依次点击File Run,选择运行方法。
方法三:从系统(system control)窗口中,点击运行(Run)键,选择运行方法。
五  方法编辑
1按照模板编辑新方法
(1)点击方法编辑窗口中File>New,或点击工具栏中”New Method”按钮, 打开新方法编辑窗口;
(2)
(2) 在“For system”栏中选择运行方法的系统,
    选择“No Template”则可自行编辑方法;
(3) 在“Technique”栏中选择层析技术,可选内容有:
Anion Exchange:  阴离子交换
Cation Exchange: 阳离子交换
RPC:            反相层析
HIC:            疏水层析
Size Exclusion:  分子排阻(凝胶层析)
Affinity:        亲和层析
Any:            通用模板
(4) 在“Template”栏中选择模板类别,以离子交换及凝胶过滤为例,有如下选择
IEX Templates(离子交换模板)600x22助燃剂:
CIP (在位清洗)
Manual Injection FP BufferPrep
Manual Injection FP Segmented
纸板加工Manual Injection V BufferPrep
Manual Injection V Segmented
GF Templates (凝胶过滤模板):
Manual Injection FP Isocratic
Manual Injection V Isocratic
模板解释:
Manual Injection: 样品由手工(用注射器等)储存在样品环中,再由进样阀将样品注入层析柱
F: 用收集器(Fraction-900)分布收集
P: 使用计峰收集(Peak Fraction)功能
V: 用出口阀(Outlet Valve)分段收集
BufferPrep: 使用自动缓冲液配置
Segmented: 不用自动缓冲液配置,可使用梯度
Isocratic: 单一流动相
(5) 在“For column”栏中,选择所用层析柱型号,若在列单中没有,则选择“Any
(6) 点击“OK”键
(7) 若各参数符合要求,则选择“File>Save”,即可完成新方法编辑。
2  方法编辑
若按模板编辑的方法不能满足要求,或对已使用过的方法进行调整,可在“Method Edit”窗口中对方法进行编辑。编辑可分两类:1 运行参数编辑;2 程序编辑。
(1) 运行参数编辑 (Run setup
在菜单中选择“View>Run setup”,则进入运行参数编辑窗口,各编辑窗口的内容为:

本文发布于:2024-09-21 03:35:38,感谢您对本站的认可!

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