岛津紫外可见分光光度计UV-PROBE简易使用指南

岛津紫外可见分光光度计UV-PROBE简易使用指南

UVProbe简易操作手册

UVProbe 简 介

UVProbe主要包括四部分

光谱模块：可进行紫外、可见区的光谱扫描和波长分析；

光度模块：分析定量数据，可进行多波长、单波长、峰高或峰面积定量。校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。由于具有自定义方程的功能，DNA/蛋白质测定等可使用UVPROBE自编程序进行测定；

动力学模块：对时间变化和Michaelis-Menten计算，一般测定吸收值随时间的变化，通常用于酶反应随时间的变化。

报告模块：自定义或调用格式，可使用链接或嵌入数据建立报告模板来打印数据。

各模块在软件上的显示（此时“报告模块”被选中）：

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目 录

第1章：初始画面

第2章：装置连接

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第3章：光谱测定方式

3-1参数和显示的设置

3-2光谱测定

3-3数据处理功能

1．波长范围和纵轴范围的变更

2．峰谷检测

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3．光谱线彩的改变等

4．面积计算

5．数据计算

6．其他

第4章：光度测定方式

4-l 参数和显示的设置

4-2 定量测定

第5章：动力学方式

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第1章：启用软件初始画面

双击桌面UVProbe图标以后，出现以上对话窗，需输入设定用户名和密码，点击OK确定。（默认：admin, 无密码）

也可以采取非安全模式安装系统，那么进入系统时不需要输入用户名和口令。

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第2章 装置的连接

首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器。操作完毕如下图①所示，从加装的仪器列表选择；使用时点击实际连接的仪器，例如下图的UV- 2450，然后点击下图的连接键②，这样装置与PC机连接（连机前必须先确认通讯电缆的连接、通讯COM口的指定）并开始初始化界面。

① ②

初始化大约需要5分钟，进行一系列的检查和初始化，如一切顺利通过就可以开始测定。

初始化界面：

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第3章 光谱测定方式

3-1参数和显示的设置

1．参数的设定：点击菜单栏上的键，即可出现如下图所示的选择测定条件的画面：

在此对话框中可选择波长测定的范围、扫描的速度、采样间隔等条件。

点击图中［试样准备］标签，可输入重量、体积、稀释因子、光程长等信息。

点击图中［仪器参数］标签，可选择测定种类（吸收值、透射率、能量、反射率）以及狭缝等条件。（UV-1600／1700的狭缝分别固定为2nm/lnm不可选择）

如果使用多联地或注射式抽吸装置等附件时，可点击附件标签设置各附件相关的参数条件。

2，显示设置

点击主菜单上的以及方法面板（右键）。

键，可分别开关图象面板（图中的左键）、数据处理面板（中）第　３　页　共　２０页　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　岛津企业管理（中国）有限公司

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数据处理面板

图象面板

方法面板

3-2 光谱测定

① ② ③ ④ ⑤

先在参比、样品池置入空白，点击上图②校正基线，然后点击③设置波长到500nm，再点击①自动调零。（由于一般的分光光度计的能量在500nm左右最强，在此自动调零可得到最正确的基线。）通常上述操作在开机后进行一次就足够了。

此后，更换样品池空白为待测样品，点击④键即可开始测定。岛津企业管理（中国）有限公司　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　第4页 共 20页

UVProbe

3-3 数据处理功能

1．波长范围以及纵轴范围的变更

变更范围只需点击图象上最大和最小的位置，再输入适当数字即可。

点击需要变更的位置，然后输入需要的数值就可改变范围

得到新设置范围的光谱

此外，在图象上点击鼠标右键，在出现的快捷菜单上选择自动标尺也能使标尺设置到适当大小。

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2．峰谷检测

点击主菜单上的［数据处理——峰值检测］，出现如下画面。

①

此处的数据处理面板中出现峰谷表，该结果使用了上一次设置的检测条件，用户可根据自己的需要改变。如果图中有多条光谱，这些光谱的峰谷表都将出现在数据处理面板中，点击表格下的①标签可切换。

在数据处理面板上点击鼠标右键，出现左下图快捷菜单，在此菜单中可选择是否在图象中显示峰谷的标记等，在快捷菜单上点击属性，出现右下图。

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在属性对话框中可设置阈值，改变峰谷检测的灵敏度。如果点击峰的标签，出现下图：

用户可选择在图中标注的内容和形式。下图是上述选择后的图象。

图中峰谷都有编号，分别用向下和向上的箭头表示其位置。

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3．光谱颜的变更

在图象面板上点击鼠标右键，出现如左下菜单，在其中选择自定义后，将出现右下图：

由上图可见，光谱的颜、线的类型、线的粗细等等均可自由地设置。

如果在快捷菜单上选择十字游标，光谱面板中出现十字游标，可自由移动，便于读取峰谷的位置及强度。如果选取图例的话，图中就可出现光谱的图例。如下图：

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4．面积计算

如果要计算光谱的面积，请在主菜单中选择［数据处理——面积计算］

①读数条

②

上图①是读数条，左右移动决定光谱面积计算的范围，②显示计算结果。

③

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上图中积分区域的图象格式及彩可以改变，点击图中③所指的区域出现下图：

在此，即可选择颜和网格等格式。面积计算可反复进行，没有限制。如果计算面积的区域想删除，可在欲删除的区域中点击鼠标右键，从出现的菜单中选择删除。

此外，上图中面积计算到了基线，如果希望改变，从菜单上选择属性：

在基线到零的选择框中取消标记，图象和数据处理面板上的结果都将改变。

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5．数据处理

测定的光谱可进行各种计算。从主菜单上选择［数据处理——计算］：

如果图象上不止一条光谱，需先选择需要处理的数据集，然后选择运算符及常数，最后点击计算键。

输入保存结果的文件名，点击确定键，经过计算的光谱（数据集）将重叠显示在图象面板中。

6．其他

6．1 选点检测

选点检测可以从已经得到的光谱中选取任意多个点的数据，选择时只要拖动读数条或在下图的波长列中手动键入波长值即可。

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6．2数据打印

使用自定义模板，可在下图左侧图标选择。然后在相应项目位置添加待打印谱图信息。

调用模板在Programe filesShimadzuUVProbe Reports安装目录下。然后在相应各项目位置右键添加待打印谱图信息即可打印。

另外，测定的光谱可数字化（表格化）表示

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表格的数据与实际采集的范围和间隔相同。如果想改变，点击鼠标右键调出属性菜单，然后可设置表

格的范围以及显示的间隔。

此外，无论是数据面板上的表格或图象面板内的光谱都可用复制粘贴的办法将数据或图象转移到其他市售的软件，例如［MS WORD］和［Excel］等。

如果打开的光谱较多，既可以全部一起显示也可以选择显示，选择时在数据面板上点击鼠标右键，然后选择属性，在此取舍显示与否。见下图：

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先点击要隐藏的数据集，然后按隐藏键即可。注意，此操作只从图象上消除了该数据集，实际上数据集仍然在计算机的内存中。

6．3图象面板上图象的删除

欲删除图象面板中的图象，先在主菜单上选择［文件——属性］。得到下图：

6．4改变坐标轴的显示位数

选择［显示——设置］出现下图，可在图中的划圈部分改变位数。

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第4章 光度测定方式

4-l参数及显示的设置

1．参数的设置

点击菜单栏中的键，出现下图：

测定的方式

选择测定波长的列名

选择和登录波长

登录后的波长显示区

此处显示的波长类型是“点”表示测定高度，如果选择的是范围，则需输入起始和结束波长，并可选择最大、最小、峰、谷或面积等作为定量的依据。

无论如何选择，波长都是必须的，并要点击“加入”以后才有效。

2．显示设置

在某单栏上有右列各品表（左2）、

工作曲线图（右2）和样品图（最右）。

键，点击以后分别出现标准表（最左）、样第　１５　页　共　２０页　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　岛津企业管理（中国）有限公司

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标准表

工作曲线

样品表

样品图

4-2 定量测定

1．光度测定

如前所述，选择了点及波长，然后在方法中选择校准，在此决定用工作曲线法定量，并选择多点、单点或K因子法等。关闭方法画面后出现如下图象

进行定量测定也需要基线校正和自动调零，方法如前面所述。

此后，样品室内逐个放入标准，点击上图下方的“读数”键即可。注意，无论是测定标准或未知样品，必须输入名称才有效。标准测定完毕，工作曲线自动显示。此时，方可测定未知样品的浓度（定量）。

有时不测定浓度，只测定某些波长的读数，则在校准方法中选择“原始数据”，在登录时选择若干需要的波长，即可测定各波长的光度值。

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在工作曲线图象上点击鼠标右键，选择属性，可从该图象上得到许多信息，见下图：

只需在这些显示的项目中做标记，相应的信息即出现在工作曲线图象的左下方。见下图的划圈部分：

2．K因子法

所谓K因子法实际上可称为已知工作曲线法（而且不局限于直线），即工作曲线回归方程的系数和次数已知，故而只要输入这些系数以及工作曲线的次数。这一方法对工作曲线较为稳定的日常分析非常有效。设置方法见下图：

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第5章 动力学方式

5-1参数和显示的设置

1．参数的设置

在菜单栏中点击方法键

，得到如下图象：

此处的计时方式选择的是“自动”，时间总量中需手动设置测定的时间。由于是自动计时方式，所以采样步长（图中为时间周期）和读数次数将根据时间总量自动设置。此外可设置波长以及活度计算的开始和结束时间。设置太短的活度范围会出现错误信息。相反，如果计时方式选择手动，则可输入时间周期和读取次数，而时间总量（测定时间）会根据输入的时间周期和读取次数自动计算得到。活度范围用于酶反应随时间的变化，如果单纯进行时间扫描的话，则可不考虑活度范围。

测定的波长栏内可选择单波长或双波长（波长l - 波长2 或 波长l / 波长2）两种方法。选择后输入相应的波长。

主菜单中有如右各键，自左到右分别是时间扫描图象、数据处理面板、测定参数面板和酶活度图象。点击各键屏幕出现相应面板。下图中表示已经测定得到数据的显示情况。

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本手册结尾。

UVProbe的功能极其丰富，本简易操作手册旨在帮助用户熟悉了解最最基本的一部分操作，详细信息请参考随机说明书和UVProbe软件的在线帮助。

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